结合疫苗,又称为偶联疫苗,如肺炎链球菌疫苗,属于一类特殊的疫苗。结合疫苗的工作原理是将是把小分子抗原(通常是多糖)结合在大分子载体蛋白上,而这种载体蛋白通常能够引发强烈的免疫反应。接种结合疫苗不仅能产生大量抗体,再次接种时,会对之前的剂次产生加强作用,从而导致产生抗体的速度更快、浓度更高、保护作用更强。结合疫苗目前已广泛应用于医学上,如儿童免疫、流感疫苗及HPV疫苗等等。肽段覆盖率是指检测到的肽段氨基酸数量占该蛋白质总氨基酸数量的比例。结合疫苗载体蛋白分析中,肽段覆盖率对结合疫苗载体蛋白鉴定的可信度判定具有重要意义,肽段覆盖率越高,所鉴定的结合疫苗载体蛋白可信度就越高。
结合疫苗载体蛋白鉴定过程一般只使用Trypsin对抗体蛋白进行酶切,鉴定到的肽段覆盖率约为60%。为了得到结合疫苗载体蛋白的全部序列信息,百泰派克生物科技(BTP)选用蛋白鉴定过程中常用的6种蛋白酶(Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N)分别对靶蛋白进行酶切和鉴定,在得到更多的碎裂肽段片段的同时,经过肽段之间的拼接完成蛋白序列100%的测定。
生物制品表征肽段覆盖率分析示意图
百泰派克生物科技(BTP)采用ISO9001认证质量控制体系管理实验室,获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务。我们应用现有的质谱技术平台,为您提供以LC-MS/MS为基础的肽段覆盖率分析,此分析可以用于确认重组结合疫苗载体蛋白是否得到完整表达,检测重组结合疫苗载体蛋白表达过程是否发生断裂,主要用于蛋白一级结构的确认,通过使用多种蛋白质酶切反应和液质联用技术对肽段的测序,结合专有的分析软件,对任何非特异性蛋白酶酶解产物的质谱数据进行分析,实现对所测结合疫苗载体蛋白序列的100%覆盖。
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