01
请问有真菌细胞壁多糖提取的具体方
法吗
真菌细胞壁多糖提取的过程大致包括菌种培养和收集、细胞壁分离、细胞壁多糖提取、多糖纯化这几个步骤，不同种类的真菌，可能需要一些特殊的处理步骤，以确保多糖的完整提取。这里我们以一种常见的真菌——酵母菌为例，详细介绍这个流程 。
1. 真菌培养和收集：
选择合适的酵母菌种进行培养。可以使用液体培养基或固体培养基，培养条件包括适宜的温度、pH值和培养时间。然后通过离心等方法，将菌体收集起来。
2. 细胞壁分离：
将培养好的酵母菌菌株进行离心，收集菌丝。然后使用适当的方法（如超声波处理、酶解等）破坏菌丝细胞，使细胞壁与胞浆分离。
3. 细胞壁多糖提取：
将分离得到的细胞壁利用酸或碱的热水提取多糖，比如使用2%的醋酸热水提取2-3小时。提取过程可能需要多次进行，以确保提取尽可能多的多糖 。
4. 多糖纯化：
对提取得到的多糖进行纯化。常用的纯化方法包括沉淀法、离子交换层析法、凝胶过滤层析法等。通过这些方法可以去除杂质，得到纯净的多糖。
5. 多糖检测：
最后可以利用高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、核磁共振法（NMR）等对纯化得到的多糖进行分析，这些方法可以确定多糖的组成、结构和分子量等特性。
02
用deae柱过完多糖之后透析，怎么选
择透析袋截留分子量？测多糖分子量
大小怎么操作？
透析袋的选择主要取决于你想要保留的分子的大小。透析袋的规格通常由它的截留分子量 (Molecular Weight Cut Off, MWCO) 决定，这个数值表示只有小于这个分子量的物质才能通过透析袋的膜。因此，你需要选择一个MWCO比你想要保留的分子的分子量稍小的透析袋。例如，如果你想要保留的多糖的分子量为10,000道尔顿，那么你应该选择一个MWCO为6,000-8,000道尔顿的透析袋。
测量多糖分子量的方法有很多，其中常用的有凝胶渗透色谱（Gel Permeation Chromatography, GPC），也被称为大小排阻色谱。此方法根据分子大小对多糖进行分离，然后通过比较已知分子量的标准物质，可以确定未知多糖的分子量。值得注意的是，进行此类实验时，需要确保实验条件（如溶剂、柱材料等）与使用的标准物质一致，以确保结果的准确性。
03
灵芝多糖用DMSO融化有步骤吗？
灵芝多糖是从灵芝中提取得到的一种多糖类化合物，通常是以固体形式存在的，它在一些生物活性研究和药物开发中具有重要作用。对于灵芝多糖的溶解，常用的溶解剂之一是二甲基亚砜（DMSO）。以下是将灵芝多糖用DMSO融化的步骤。
1.准备样品：
将灵芝多糖制备成粉末状。可以通过冷冻干燥等方法将灵芝多糖溶液冻结，并将冻干后的多糖样品研磨成粉末。
2.加入DMSO：
将准备好的无水无菌的DMSO缓慢滴加到灵芝多糖的粉末中，并用磁力搅拌器搅拌溶解，使多糖充分分散。
3.等待融化：
在室温或轻微加温（如37°C）的条件下进行溶解。避免高温溶解，以免影响多糖的生物活性。
4.过滤：
根据需要，可以对溶解后的多糖溶液进行过滤处理，去除未溶解的颗粒物或杂质。
5.存储：
将溶解后的灵芝多糖样品储存于阴凉、干燥和密封的容器中，避免阳光直射。
注意事项：
在处理 DMSO 时，请注意安全操作，并在实验室中使用适当的防护措施，例如戴手套和穿实验服。
保持实验环境干净，并避免样品被外来杂质污染。灵芝多糖溶解后的 DMSO 溶液可以用于后续实验或存储。
如需存储，应避免阳光直射，并在适当的温度下保存。
04
用多糖做cck8要先灭菌吗？自己冻
干的多糖如何灭菌，能过滤膜或者
高压吗？
先来说第一个问题，关于灭菌的必要性，我们需要明确的是在进行细胞实验时，是需要严格灭菌的，以防止可能存在的细菌或其他微生物的污染。CCK-8实验也不例外。
过滤灭菌和高压灭菌都是常用的多糖灭菌方法，它们各自也有不同之处。
1.过滤灭菌：
适用于溶液型的多糖。如果多糖溶液的粘度不是特别高，并且分子量相对较小，您可以使用适当孔径的滤膜（如0.22微米）来过滤灭菌。
2.高压灭菌：
如果多糖能够承受高温和压力，那么您可以使用高压灭菌锅来灭菌。通常，需要在121°C下加压15psi进行15-20分钟的处理。
至于已经被冻干的多糖，您可以选择高压灭菌，可以先将其溶解在合适的溶液中，然后进行过滤灭菌。
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