一步法免染PAGE凝胶快速制备

文摘   2024-11-08 17:14   北京  


Western Blot即蛋白质印迹法, 是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。在进行Western Blot的过程中,很多小伙伴还在因为考马斯亮蓝染色后凝胶无法进行转膜而苦恼,甚至需要制备两张同样的凝胶来验证跑胶结果,不仅需要忍受考马斯亮蓝的刺激性气味,还要心惊胆战的等待染色结果,实验中充满不确定性。
现在,Coolaber推出一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒。本产品将一步法制胶与免染技术相结合,无需染胶,蛋白条带可直接紫外曝光成像,方便快捷,省时省力。到这里还没有结束,你以为免染胶只能在凝胶上看到荧光条带吗?No!转膜后,依旧可以在膜上观察到清晰的蛋白条带,并且可以借此判断转膜效率。从此,不染胶不染膜,一胶两用,再也不用羡慕核酸胶的紫外成像啦!

产品信息

产品清单

产品组分


运输与保存

常温运输;2-8℃储存,保质期12个月。

产品特点

1. 紫外成像:无需染胶,紫外曝光一定时间后,可以直接实现蛋白条带可视化。

2. 一步制胶:灌入下层胶混合液后无需液封等待其凝固,可直接灌入上层胶混合液,实现一步法快速制胶,室温约15 min后即可电泳。

3. 简单快速:上下层胶均由两种溶液组成,按1:1两两混合后,加入相应的10% APS即可。

4. 彩色上层胶:上层胶中分别加入了不同颜色染料,方便点样和区分不同浓度凝胶。

5. 避免异味:无需添加TEMED,避免恶臭气味。

6. 条带清晰:5种不同浓度的蛋白凝胶预混液制胶、电泳,均可观察到清晰的条带。

使用效果

分别用Coolaber一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒与A品牌、B品牌的同款试剂盒制胶后电泳,得到的凝胶经紫外照射5 min进行荧光激发。结果表明,Coolaber一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒可以实现250 ng总蛋白条带的可视化,且无论是条带亮度还是检测灵敏度均优于A品牌和B品牌试剂盒(图1)。将凝胶转膜后,仍然可以在膜上观察到清晰的荧光条带,借此判断转膜情况(图2)。

图1 Coolaber免染PAGE胶使用效果对比图

注:预染蛋白Marker货号:DM2616,10-180 kD,10条带。


图2 Coolaber免染PAGE胶转印后PVDF膜紫外成像效果图

注:预染蛋白Marker1货号:DM2618,10-250 kD,11 条带;预染蛋白Marker2货号:DM2616,10-180 kD,10条带。

温馨提示

1. 紫外激发显色需要一定时间,一般5分钟左右可看到清晰条带,10分钟后达到最大亮度。若要观察凝胶转印后膜上蛋白条带,必须在电泳后,将凝胶经紫外激发出现清晰条带后,再进行转膜。若直接转膜再用紫外激发,荧光信号会很弱或无信号。
2. 紫外线穿透能力弱,胶与载物台之间不可有玻璃、薄膜或透明塑料隔板等。

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END


Coolaber
专注生命科学,专心服务科研。致力于打造更优质、更方便、更经济的生物试剂产品。成就客户!精益求精!诚实守信!合作共赢!构建生物科技创新中心,铸造生物试剂标志企业。官方网站:www.coolaber.com联系电话:400-878-6800
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