Western Blot即蛋白质印迹法， 是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法，广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。在进行Western Blot的过程中，很多小伙伴还在因为考马斯亮蓝染色后凝胶无法进行转膜而苦恼，甚至需要制备两张同样的凝胶来验证跑胶结果，不仅需要忍受考马斯亮蓝的刺激性气味，还要心惊胆战的等待染色结果，实验中充满不确定性。
现在，Coolaber推出一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒。本产品将一步法制胶与免染技术相结合，无需染胶，蛋白条带可直接紫外曝光成像，方便快捷，省时省力。到这里还没有结束，你以为免染胶只能在凝胶上看到荧光条带吗？No！转膜后，依旧可以在膜上观察到清晰的蛋白条带，并且可以借此判断转膜效率。从此，不染胶不染膜，一胶两用，再也不用羡慕核酸胶的紫外成像啦！
产品信息
产品清单
产品组分
运输与保存
常温运输；2-8℃储存，保质期12个月。
产品特点
1. 紫外成像：无需染胶，紫外曝光一定时间后，可以直接实现蛋白条带可视化。
2. 一步制胶：灌入下层胶混合液后无需液封等待其凝固，可直接灌入上层胶混合液，实现一步法快速制胶，室温约15 min后即可电泳。
3. 简单快速：上下层胶均由两种溶液组成，按1：1两两混合后，加入相应的10% APS即可。
4. 彩色上层胶：上层胶中分别加入了不同颜色染料，方便点样和区分不同浓度凝胶。
5. 避免异味：无需添加TEMED，避免恶臭气味。
6. 条带清晰：5种不同浓度的蛋白凝胶预混液制胶、电泳，均可观察到清晰的条带。
使用效果
分别用Coolaber一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒与Y品牌、B品牌的同款试剂盒制胶后电泳，得到的凝胶经紫外照射5 min进行荧光激发。结果表明，Coolaber一步法免染PAGE凝胶快速制备试剂盒可以实现250 ng总蛋白条带的可视化，且无论是条带亮度还是检测灵敏度均优于Y品牌和B品牌试剂盒（图1）。将凝胶转膜后，仍然可以在膜上观察到清晰的荧光条带，借此判断转膜情况（图2）。
图1 Coolaber免染PAGE胶使用效果对比图
注：预染蛋白Marker货号：DM2616，10-180 kD，10条带。
图2 Coolaber免染PAGE胶转印后PVDF膜紫外成像效果图
注：预染蛋白Marker1货号：DM2618，10-250 kD，11 条带；预染蛋白Marker2货号：DM2616，10-180 kD，10条带。
温馨提示
1. 紫外激发显色需要一定时间，一般5分钟左右可看到清晰条带，10分钟后达到最大亮度。若要观察凝胶转印后膜上蛋白条带，必须在电泳后，将凝胶经紫外激发出现清晰条带后，再进行转膜。若直接转膜再用紫外激发，荧光信号会很弱或无信号。
2. 紫外线穿透能力弱，胶与载物台之间不可有玻璃、薄膜或透明塑料隔板等。
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