Mach1-T1感受态:载体构建加速器
载体构建作为大量分子生物学实验的前提,很大程度影响课题的研究进展。当我们好不容易赶在晚上下班前做了转化,隔天大早上却对着平皿望眼欲穿。计划赶不上变化,科研的梦总被实验的不顺利惊醒,浑身失去动力。为了解决这一痛点、加速实验进程,在此给大家介绍一款目前生长速度更快的大肠杆菌Mach1-T1。
产品简介
Mach1-T1大肠杆菌感受态细胞缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型 (recA1398)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性;lacZΔM15的存在使Mach1-T1可用于蓝、白斑筛选;tonA 突变赋予Mach1-T1菌株对噬菌体T1和T5的抗性。
Fast
生长速度比常用的DH5α、Top10更快,能在8-9小时内看见单克隆,显著加快实验进程,科研路上快人一步。
Faster
Mach1-T1感受态细胞经特殊处理,外源DNA吸收效率更强,转化率更高。正常转化流程下pUC19质粒转化效率可达1010 cfu/μg。超高转化效率,减少试错成本,科研路上快人两步。
Fastest
Mach1-T1兼容快转法,以往需要60-90 min的转化时间缩短至5-10 min即可涂布平板,经pUC19验证转化效率>109 cfu/μg,科研路上快人三步。
产品特点&优势:
转化效率?转化时间?感受态品质?
操作步骤
标准转化流程:
1. 取100 µL冰上融化的感受态细胞,加入质粒DNA或连接产物,轻轻混匀,冰上静置25 min。
2. 42℃水浴热激45 s,迅速转移至冰上,静置2 min。
3. 加入600 μL无抗LB培养基,37℃ 200 rpm,复苏60 min。
4. 5000 rpm离心1分钟收集菌体,留取100 μL左右上清轻轻吹打重悬菌体并涂布到含相应抗生素的LB培养基上,将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
10min快转流程:
1. 取100 µL冰上融化的感受态细胞,加入质粒DNA或连接产物,轻轻混匀,冰上静置5 min。
2. 42℃水浴热激45 s,迅速转移至冰上,静置2 min。
3. 直接吸取100 μL的感受态玻璃珠涂布到含Amp抗生素LB培养基上,将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
图1 Mach-T1标准流程转化和10 min快转pUC19转化效率分别为1010与109 cfu/μg。
图2 DH5α 和 Mach-T1 生长速度对比