2024年诺贝尔生理学或医学奖近日在瑞典卡罗林斯卡医学院揭晓，授予维克多·安布罗斯（Victor Ambros）和加里·鲁弗肯（Gary Ruvkun），以表彰他们在microRNA发现及其在转录后基因调控中作用研究方面的贡献。他们在小蠕虫秀丽隐杆线虫（C. elegans）中的开创性发现揭示了一种全新的基因调控原理。这一发现对包括人类在内的多细胞生物至关重要。microRNA在生物体的发展和功能中被证明是至关重要的。
microRNA（miRNA）是在真核生物中发现的一类内源性的、具有调控功能的非编码RNA，其大小约20~25个核苷酸（nucleotides，nt），主要发挥基因转录后水平的负调控作用。miRNA在动物、植物、真菌等生物中普遍存在，并对其生长发育起着非常重要的调控作用，几乎涉及到了所有细胞水平方面的功能，在动物和植物中被广泛研究。无论是芯片分析，还是miRNA的克隆，miRNA的提取都是最基础的步骤。由于miRNA长度短、浓度低，并且具有高同源性和极易降解的内在特征，给miRNA的提取带来一定困难。以往传统的RNA提取试剂盒都是为了回收mRNA而设计的，往往会弃去较小的RNA分子以提高mRNA得率，而这些步骤会导致miRNA的损失。多数RNA提取试剂盒不能有效地回收miRNA。
为了高效地提取miRNA，Coolaber全新推出了通用型miRNA提取试剂盒，采用专门的miRNA富集和纯化技术，能够更有效地提取和纯化miRNA，提高提取效率和特异性，同时减少DNA和蛋白质的污染。提取得到的高纯度miRNA产物可直接用于miRNA建库、RT-qPCR、Northern Blot等分子生物学实验。Coolaber通用型miRNA提取试剂盒（货号：RE612）适用性广、质量更高、操作时间更短，在众多miRNA提取分离试剂盒中脱颖而出。
脱颖而出的miRNA提取试剂盒RE612
产品特点
1. 适用性广：适用于动植物组织、细胞和微生物样本的总RNA、大片段RNA及miRNA提取。
2. 方便快捷：操作简便，即便是多个样本的提取也可在30 min - 1h内完成全部实验操作。
3. 质量高：RNA完整性好，无基因组DNA残留；浓度高，可满足下游实验需求；纯度高，OD260/280比值可达1.8-2.2。
4. 颜色指示：采用特殊颜色指示剂指示分层，便于吸取上清。
5. 兼容性强：产物可直接用于芯片分析；Northern杂交；RT-PCR；miRNA文库构建等
运输与保存：本试剂盒各组分均为常温运输；各组分按所示温度保存即可。
产品原理
通过裂解组织细胞释放RNA，并抑制RNA酶活性以防止降解；随后利用硅基质膜对核酸的特异性吸附能力，通过加入一定比例的乙醇使大片段RNA结合在第一个RNA吸附柱上，而小片段RNA留在滤液中；将滤液加入等体积乙醇，使小片段RNA结合在第二个RNA吸附柱上，再通过洗涤步骤去除杂质，实现miRNA的分离纯化；最后使用低盐溶液将纯化后的RNA从吸附材料上洗脱下来，收集得到高纯度、无杂质残留、完整的miRNA，以供后续分子生物学实验使用。整个过程旨在高效、纯净地提取样品中的miRNA。
产品使用效果
1.使用通用型miRNA提取试剂盒提取大鼠肝脏组织Total RNA和miRNA
用通用型miRNA提取试剂盒分别从等量样本（大鼠肝脏组织）中提取Total RNA和miRNA，通过琼脂糖凝胶电泳和荧光定量检测等检测Total RNA和miRNA产物。结果如图1所示，通用型miRNA提取试剂盒提取得到的miRNA产物纯度高，分离出的miRNA产物更加干净，不含有大分子RNA，如28S rRNA、18S rRNA等。经过RT-qPCR验证miRNA被顺利分离并与下游实验兼容。
图1 大鼠肝脏组织提取的Total RNA和miRNA检测结果图
2.使用通用型miRNA提取试剂盒提取玉米叶Total RNA和miRNA
用通用型miRNA提取试剂盒分别从等量样本（玉米叶片）中提取Total RNA和miRNA，通过琼脂糖凝胶电泳和荧光定量检测等检测Total RNA和miRNA产物。结果如图2所示，通用型miRNA提取试剂盒提取得到的miRNA产物纯度高，分离出的miRNA产物更加干净，不含有大分子RNA，如28S rRNA、18S rRNA等。经过RT-qPCR验证miRNA被顺利分离并与下游实验兼容。
图2 玉米叶片提取的Total RNA和miRNA检测结果图
以上结果表明，使用Coolaber通用型miRNA提取试剂盒提取到的miRNA无大片段RNA残留，可以直接应用于下游RT-qPCR实验。
3.与竞品公司对比浓度
分别使用Coolaber通用型miRNA提取试剂盒和与T公司的miRNA提取试剂盒从不同动物组织和植物组织中分别提取等量样本进行实验，结果图3和图4所示，Coolaber通用型miRNA提取试剂盒比T公司试剂盒提取的miRNA浓度更高。
图3 动物组织miRNA提取浓度对比图
图4 植物组织miRNA提取浓度对比图
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