大提质粒对植物原生质体转化的影响
PE036
去内毒素质粒大提试剂盒(增强型)
众所周知,原生质体可谓是没有盔甲保护的宝宝,对外界环境十分敏感。因此,在原生质体制备及转化过程中需要实验者无比温柔的对待,否则一不小心就“碎”给你看。
在原生质体转化实验中,除了转化液的成分,质粒的质量也是影响转化效率高低的决定性因素。为了保护原生质体宝宝免受伤害,原生质体在转化时所用质粒的质量也需要高标准、严要求。通常,每组原生质体转化实验需要5-10 μg质粒,小提或中提无法满足此需求。所以实验者会选用大提的方法,准备足量质粒进行实验。
大体积的实验往往常伴随着粗糙、耗时等弊端,大提质粒也会遇到如此问题。
①纯度:大提质粒虽然可以提取到足量的DNA,但是纯度可能达不到细胞转染级别。残留的RNA片段也可能会影响转化效率,甚至干扰外源基因在原生质体中的表达。
②毒性:大肠杆菌的细胞壁中含有脂多糖,在大提质粒的过程中,菌体裂解,脂多糖会以内毒素的形式释放,使提取的质粒中含有内毒素。在原生质体转化实验中,内毒素可谓是名副其实的杀手。使用含有内毒素的质粒进行转化,轻则无法转化,重则使原生质体粉身碎骨。
为解决以上痛点,去内毒素大提质粒方法应运而生。其中一定要夸夸本公司研发的去内毒素大提质粒试剂盒(增强型),货号PE036。
产品介绍
产品特点
①操作快:将传统的去内毒素步骤融入大提质粒操作,缩短实验流程。
②纯度高:在提取过程中加入RNase,清除裂解物中的RNA。
③可视化:在溶液中加入指示剂,便于实验者观察反应状态。
④内毒素低:Coolaber自主研发的内毒素清除剂ER,对质粒中内毒素清除效果超市面要求标准1倍。
⑤产量大:5000-10000 bp的常见质粒,Coolaber试剂盒单次提取可达0.5-1 mg。
实验结果
如图,未去内毒素质粒(A)与去内毒素质粒(B)转化水稻原生质体,去内毒素质粒转化效果大幅度提升。
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