继续更新，这次一篇CAR-T相关文章，作者研究CAR亲和力和PD-L1/PD-1抑制信号的关系，具体内容如下：
PD-L1/PD-1信号可抑制CAR-T细胞，作者想研究其中什么因素起决定作用，构建了PD-L1水平不同的肿瘤细胞，可见肿瘤抗原HER2水平相当，肿瘤细胞遇到CAR-T后PD-L1会上调
构建对肿瘤抗原亲和力不同的CAR-T：低亲和力LA，高亲和力HA；两种CAR-T CAR表达、PD-1表达相当；还做了PD-1敲除
对于低亲和力LA CAR-T，敲掉PD-1后，CAR-T响应靶细胞分泌细胞因子能力增强；高亲和力HA CAR-T上，敲PD-1并不促进细胞因子分泌，暗示高亲和力CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号
刚刚是敲PD-1，用抗体阻断PD-L1/PD-1互作，解除抑制信号也是利好低亲和力CAR-T，高亲和力CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号
刚刚是看IFNr，再看IL-2，仍然是解除抑制信号利好低亲和力CAR-T，高亲和力CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号
刚刚是看IFNr，再看IL-2，仍然是解除抑制信号利好低亲和力CAR-T，高亲和力CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号
增殖角度，还是解除抑制信号利好低亲和力CAR-T，高亲和力CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号
设计新的靶向其他肿瘤抗原的CAR-T
靶向新抗原的CAR-T上，仍然是解除抑制信号利好低亲和力CAR-T，高亲和力CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号
体内验证发现，低亲和力CAR-T抑制表达PD-L1肿瘤生长的能力弱，敲掉其上PD-1后，利好低亲和力CAR-T
无论肿瘤细胞是否表达PD-L1，高亲和力CAR-T都能有效抑制其生长，暗示在体内高亲和力CAR-T也耐受PD-L1/PD-1的抑制作用，
体内，敲PD-1只助力低亲和力CAR-T抑瘤，暗示低亲和力CAR-T对PD-L1/PD-1抑制信号更敏感，高亲和力CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号
玻片系统上，细胞因子角度再验证，仍然发现低亲和力CAR-T对PD-L1/PD-1抑制信号更敏感，高亲和力CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号
基因角度，看敲掉PD-1后对CAR-T影响，可见低亲和力CAR-T基因表达变化更大
敲掉PD-1后，利好低亲和力CAR-T各种通路
单细胞分泌组角度，看敲掉PD-1后对CAR-T影响，可见低亲和力CAR-T细胞因子分泌变化更大
敲掉PD-1后，低亲和力CAR-T多能性增强更多，暗示低亲和力CAR-T对PD-L1/PD-1抑制信号更敏感，高亲和力CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号
流式验证，敲掉PD-1后，低亲和力CAR-T可生成两种细胞因子的细胞比例更高
高亲和力CAR-T会响应正常细胞脱颗粒，低亲和力CAR-T则弱很多，暗示低亲和力的安全性
低亲和力CAR-T对正常细胞响应很低，暗示其安全性
CAR亲和力考量完了，作者还看了抗原密度，玻片系统上，对于低亲和力CAR-T，抗原密度增加利于其细胞因子分泌，对于高亲和力CAR-T则不然，抗原密度增加，细胞因子分泌反而减少
高抗原密度时，敲PD-1利好低亲和力CAR-T；低抗原密度时，敲PD-1利好高亲和力CAR-T
又考量了CAR表达比例，低亲和力时，敲PD-1利好低CAR比例CAR-T；高亲和力时CAR比例未见显著影响
至此，作者发现CAR亲和力调节CAR-T对PD-L1/PD-1抑制信号对响应，前面CAR-T对共刺激段用的是CD28，换ICOS和4-1BB看一下：ICOS和CD28一致（低亲和力CAR-T对PD-L1/PD-1抑制信号更敏感，高亲和力CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号），基于4-1BB的CAR-T耐受PD-L1/PD-1抑制信号
最后，又换了一个肿瘤抗原
对于CAR-T的研究越发细腻，之前也有文章考量亲和力“调节scFv亲和力以增强CAR-T选择性”，也发现调低亲和力的好处，后续在各种CAR-T产品上又多了一个要细细考量的指标 - 亲和力影响的是互作，最终我们要的是功能（另外，在抗体药上也发现了调低亲和力的好处“调低亲和力利好抗体引起下游信号”）。
参考文献：
Irene Andreu-Saumell, Alba Rodriguez-Garcia, Vanessa Mühlgrabner, Marta Gimenez-Alejandre, Berta Marzal, et al. CAR affinity modulates the sensitivity of CAR-T cells to PD-1/PD-L1-mediated inhibition [J] Nature Communications, 26 April, 2024.
