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摘译:杨杨
审校:苏佳纯
据文献报道,抗CRISPR 相关基因(Aca)家族的标志性特征之一就是有保守的HTH结构域,并借此结构域来发挥转录调控抑制功能。因为在acrIF23-24的操纵子上,未发现相关Aca基因,且在AcrIF24的C端预测到HTH结构域,故推测AcrIF24既可以发挥Acr的功能,同时也发挥Aca的功能。
图3 铜绿假单胞菌PA14菌株β-半乳糖苷酶活性测定
在后续AcrIF24的anti-CRISPR功能的研究中,研究人员发现,AcrIF24可诱导非特异性dsDNA与Csy复合体结合。EMSA实验结果显示任何浓度的AcrIF24都没有抑制目标dsDNA的结合,但在较高的AcrIF24浓度下观察到了一条清晰的条带,与Csy-dsDNA复合体相比,其大小有所增加(图4,左半)。这一结果表明形成了一个三元络合物(即csy-AcrIF24-dsDNA)。
dsDNAsp为目标dsDNA,dsDNAns为非特异性dsDNA。
图5 Csy-AcrIF24-dsDNA复合体的冷冻电镜结构
图6 AcrIF24结合多个Cas7f亚基的冷冻电镜结构
【参考文献】
Yang L, Zhang L, Yin P, Ding H, Xiao Y, Zeng J, Wang W, Zhou H, Wang Q, Zhang Y, Chen Z, Yang M, Feng Y. Insights into the inhibition of type I-F CRISPR-Cas system by a multifunctional anti-CRISPR protein AcrIF24. Nat Commun. 2022 Apr 11;13(1):1931. doi: 10.1038/s41467-022-29581-1. PMID: 35411005; PMCID: PMC9001735.
点
评
该研究发现和解析了AcrIF24的作为Acr和Aca的双重功能以及对I-F型 CRSRPR-Cas 系统的抑制机制,拓展了对细菌和噬菌体的互作机制新的认知。