过氧化物通常指含有过氧基-O-O-的化合物，可看成是过氧化氢的衍生物。在小分子药物研发中，化合物合成路线中避免不了使用含有过氧化物的有机试剂，例如四氢呋喃，二甲基四氢呋喃，1,4-二氧六环等。
有机试剂中过氧化物水平过高，会有以下几点负面影响：
#01
使用钯等金属催化剂进行的偶联反应，若是有机试剂中的过氧化物值过高，过氧化物容易氧化低价态的金属离子，从而使催化剂失活，影响反应进程。
#02
过氧化物还有可能导致一些副反应，如Baeyer-Villiger重排。
#03
#04
如何从源头上避免上述问题，即需要我们拥有检测过氧化物的手段，来评估或能够定量检测过氧化物的值。
2H2O2+2KI →2H2O+ I2+O2
过氧化氢检测试纸的范围通常是 0-25mg/L 或者 50-1500mg/L，操作简单，较短时间即可知道结果。但缺点也很明显，使用试纸无法准确测量过氧化物的值，并且试剂检测的是过氧化氢，尚不明确是否可以检测其它类型过氧化物。
法2：滴定法
欧洲药典中亦有收录过氧化物的检测章节，检测方法为滴定法，其测定结果（Ip）是以活性氧的毫当量表示1000g物质中所含过氧化物量的数值。
具体的操作过程如下：
#步骤一
将适量待测物(具体可见表1)加入到有磨砂玻璃塞的250mL锥形瓶；
#步骤二
加入50mL三甲基戊烷和冰醋酸的混合物(体积比2：3)，振摇以溶解待测物；
#步骤三
准确移取0.5mL饱和碘化钾溶液于上述溶液中，剧烈晃动锥形瓶1min后，加入30mL水；
#步骤四
选取0.01M硫代硫酸钠(V1 mL)为滴定剂，在不断剧烈摇晃的情况下进行滴定，直到黄色几乎消失，加入0.5mL淀粉溶液并继续滴定，直到蓝色全部消失。
#步骤五
进行空白测定(V0 mL)，如果空白测定超过0.1mL，则更换溶剂重新测定。
V1：滴定样品所消耗硫代硫酸钠体积，mL；
V0：滴定空白所消耗硫代硫酸钠体积，mL；
C：硫代硫酸钠的浓度，mol/L;
m：样品质量，g。
使用此法可以准确定量的测定待测物中过氧化物的值，但是也局限于药典中规定的溶剂，若待测物与所有溶剂不互溶或者会与其发生副反应，则都会影响最终的检测结果。
法3：滴定法
相较于过氧化氢检测试纸，或者欧洲药典收录的滴定法，使用高效液相色谱法来检测化合物中的过氧化物的值无疑具有更好的专属性与更广的适用性。南京药石科技分析团队开发出衍生-HPLC的方法来定量检测化合物中的过氧化物，衍生反应原理如下：
PPh3+X-OOH → X-OH+Ph3PO
使用活性比较强的三苯基膦作为还原剂，与待测物中的过氧化物发生氧化还原反应，通过外标法定量的测定衍生产物三苯基氧膦的含量，通过三苯基氧膦与待测衍生物的相对分子质量之间的系数进行折算，计算出待测物中过氧化物的含量。
下表（表1 有机试剂中过氧化物值）为市面上工业级别大宗试剂中过氧化物含量的抽检结果：
衍生-HPLC的方法检测有机试剂中的过氧化物，方法的灵敏度可以低至2ppm，线性范围比较广，结合准确度实验结果，可以在2ppm~500ppm范围内进行微量过氧化物的定量检测。同时衍生-HPLC的方法也可以应用于其它类型化合物中过氧化物含量的检测，具备更广泛的应用性。
参考文献
往期推荐
【质量分析】浅谈手性色谱柱的分离原理及应用丨No.07
【质量分析】质量风险管理在制药行业的应用丨No.06
【会议回顾】第四届MAH合作暨药品质量管理与检验创新实践大会
南京药石科技股份有限公司（股票代码：300725，公司简称：药石科技）是全球医药研发和制造领域一站式创新产品和服务供应商。公司始终致力于通过研发和生产过程中的化学和低碳技术的创新，帮助合作伙伴提高新药发现及开发效率，全速推进项目上市进程。自2008年开始运营以来，药石科技已与几乎所有全球排名前二十的制药公司及数百家中小型生物技术公司达成合作。 药石科技以其新颖、独特的分子砌块及相关化合物库筛选技术助力药物发现；并搭建一体化CMC平台，为创新药研发及商业化项目提供高效、高品质的中间体、原料药和药物制剂的工艺开发和生产服务。同时，公司整合多年来在连续流化学、微填充床技术、催化技术、药物晶体工程技术、智能制造等前沿技术上的能力积累，积极探索生物医药领域绿色、安全和智能化的先进制造及服务模式，促进行业创新发展。
公司官网: www.pharmablock.com
产品网站: product.pharmablock.com
联系我们
南京药石科技股份有限公司
地址：江苏省南京市江北新区华盛路81号
邮编：210032
电话：+86-400 025 5188
传真：+86-25 86918232
邮箱：sales@pharmablock.com
PharmaBlock (USA), Inc.
Add: 777 Schwab Road, Unit D, Hatfield, PA 19440, USA
Tel: +1-877 878 5226 / 267 649 7271
Fax: +1-267 222 7551
E-mail: salesusa@pharmablock.com
