华西生殖微信公众号已正式开通文献速递栏目，我们将持续为大家播报最新的文献资讯，时刻关注生殖医学前沿研究。
01
研究背景
子宫内膜异位症是最常见的良性妇科疾病，给社会带来了巨大的负担，但目前仍缺乏治愈性疗法。为了有效测试潜在的新疗法，亟需基于先前冷冻保存的子宫内膜异位组织构建体外模型，通过该模型再现子宫内膜异位症的不同亚型及其微环境。
02
研究目的
探究是否可以使用冷冻保存的子宫内膜异位症组织碎片建立离体子宫内膜异位症模型。
03
研究方法
通过外科手术从28名患者中获得了三种不同亚型的子宫内膜异位组织碎片，并根据三种不同的方案冷冻保存了组织碎片。解冻后，将组织碎片培养24小时，通过刃天青检测法评估组织碎片的代谢活性，并通过免疫荧光染色检测VivaFix、Hoechst 33342和α-SMA的表达，评估细胞类型特异性活力。同时，通过苏木精-伊红染色验证组织碎片中是否存在子宫内膜异位症。此外，将冷冻保存并解冻后的组织碎片用吡非尼酮或二甲双胍处理72小时，并通过RT-PCR和RT-qPCR评估整个组织碎片以及切割分离的肌成纤维细胞中COL1A1和CEMIP基因的表达。
04
研究结果
在以二甲基亚砜为基础的培养基中冷冻保存后，来自腹膜、卵巢和深部子宫内膜异位病灶的子宫内膜异位组织碎片的代谢活性保存良好，且与新鲜组织碎片相当。与新鲜组织相比，腹膜异位病灶的相对代谢活性为70% (CI: 92–47%)，卵巢异位病灶的相对代谢活性为43% (CI: 53–15%)，深部异位病灶的相对代谢活性为94% (CI: 186–3%)。在冷冻保存和解冻并经过24小时的培养后，腹膜异位病灶组织碎片中92% (CI: 87–96%)的细胞存活、卵巢异位病灶组织碎片中95% (CI: 91–98%)的细胞存活，深部异位病灶组织碎片中88% (CI: 78–98%)的细胞存活。经吡非尼酮或二甲双胍处理72小时后，在整个组织碎片和分离的肌成纤维细胞中均可检测到纤维化标志物COL1A1和CEMIP基因表达的差异，表明冷冻保存和解冻后的子宫内膜异位组织碎片适合用于抗纤维化干预的测试。
05
研究结论
冷冻保存的子宫内膜异位症组织碎片在解冻后以及培养至少3天后仍然存活，因此可用于建立离体子宫内膜异位症模型，以有效测试潜在的治疗药物。
参考文献:
Vissers G, Peek R, Verdurmen WPR, Nap AW. Endometriotic tissue fragments are viable after cryopreservation in an ex vivo tissue model recapitulating the fibrotic microenvironment. Hum Reprod. 2024;39(9):2067-2078.
扫描二维码
关注华西生殖，更多精彩
