细胞裂解液，又称细胞破裂液，是一种化学试剂，其主要作用是破坏生物细胞的结构，使得细胞组织中的细胞膜和细胞壁被破裂，细胞内部的生物大分子得以释放出来，通过变性处理使蛋白质稳定，防止其降解，通过抑制蛋白酶活性防止蛋白酶降解蛋白质。这些生物大分子包括DNA、RNA、蛋白质等，是进行分子生物学实验的主要物质。
根据不同的细胞类型和实验要求，裂解液有多种分类。例如，免疫组化中常用的RIPA裂解液，可有效提取膜结合性蛋白；核酸提取中常用的SDS裂解液，可以非常快速地破坏细胞并释放DNA和RNA；细胞质蛋白提取中常用的NP40裂解液，可以轻松地分离胞质和细胞核。
RIPA裂解液（Radio Immunoprecipitation Assay buffer）简介：RIPA是一种常用于从动物细胞或组织中提取蛋白质的裂解液。它通过去污剂/表面活性剂裂解细胞膜和核膜，以获取细胞和组织中的可溶性蛋白。![]()
①去污剂：包括离子型、两性离子型和非离子型去污剂。④变性剂/稳定剂：如EDTA，防止金属离子引起的蛋白质降解。SDS（十二烷基硫酸钠）：强变性，促进蛋白质溶解，破坏蛋白间相互作用。Sodium
deoxycholate：有效破坏蛋白间相互作用。Sodium
N-Dodecanoylsalcosinate：十二烷基肌氨酸钠。Triton
X-100：增加细胞膜通透性，溶解脂质。NP-40：破坏细胞膜，释放胞浆蛋白，对核膜破坏作用较弱。DDM（n-Dodecyl-β-D-maltoside）：洋地黄皂苷。强RIPA：含0.1% SDS，1%
sodium deoxycholate，1% Triton X-100。中RIPA：含0.1% SDS，0.5%
sodium deoxycholate，1% NP-40。弱RIPA：含0.25% sodium deoxycholate，1% NP-40。SDS
> Triton X-100 > NP-40选择RIPA裂解液时，应根据样本类型和下游实验的需求来选择合适的配方。不同的RIPA配方会溶解出不同量和种类的蛋白质，从而影响蛋白图谱的结果。
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裂解液使用调整指南①磷酸化蛋白的考虑：如果目标蛋白是非磷酸化蛋白，可以不添加磷酸酶抑制剂。②免疫沉淀（IP）背景高：如果IP实验背景高，可以选择裂解度高的裂解液，这有助于提高抗原的提取效率，从而减少非特异性结合。③目的蛋白免疫沉淀效果不佳：如果目标蛋白在IP实验中沉淀不下来，可以尝试使用裂解度低的裂解液，这有助于保持蛋白的天然状态，减少蛋白的变性。④核蛋白的提取：当目标蛋白为核蛋白时，应使用强裂解液，因为核蛋白通常与DNA结合得更紧密，需要更强的裂解条件来释放。①在调整裂解液时，应考虑蛋白的稳定性和裂解液对蛋白活性的影响。②磷酸酶抑制剂和蛋白酶抑制剂的使用应根据实验的具体需求来确定。③对于难以裂解的细胞或组织，可能需要使用物理方法（如超声或机械研磨）辅助裂解。蛋白纯化技术交流，请添加我们的微信：
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