脱镍步骤：
使用脱镍缓冲液：20mM 磷酸缓冲液，0.5M NaCl，50mM EDTA，pH 7.4。
作用：使用脱镍缓冲液冲洗柱子，目的是去除镍离子，防止镍离子与蛋白质过度结合，影响纯化效果。
去除沉淀蛋白、疏水性蛋白及脂蛋白：
使用1M NaOH溶液，室温下处理1-2小时（若需要去除内毒素可延长至12小时
作用：强碱环境有助于去除疏水性和脂质性蛋白，以及沉淀蛋白，因为这些蛋白质在碱性条件下容易变性，从而从柱子上脱落。
去除强离子吸附蛋白：
使用1.5M NaCl洗柱子，约10-15分钟。
作用：高盐浓度有助于竞争性地去除那些通过离子相互作用吸附在柱子上的蛋白质。
挂镍步骤：
加入0.5ml（1ml柱子）或者2.5ml（5ml柱子）0.1M的NiSO4，使用5个柱体积的去离子水冲洗，再用缓冲液冲洗5个柱体积，最后置换到20%乙醇中保存。
作用：重新挂镍是为了在柱子上重新固定镍离子，以便进行下一次的纯化工作。使用乙醇保存可以防止微生物污染和镍离子的流失。
Tel：13919799919（许晶晶）
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