近日，南京财经大学陆颖健教授团队在食品权威期刊《Food Control》（中科院1区，IF=5.6）上发表题为“Rapid and accurate AuNPs-sodium deoxycholate-propidium monoazide-qPCR technique for simultaneous detection of viable Listeria monocytogenes and Salmonella”的研究性论文。其中博士研究生黄嘉明为第一作者，孙静老师和陆颖健教授为共同通讯作者。
单增李斯特菌和沙门氏菌是乳制品中常见的病原体，可导致食源性疾病。快速准确的检测对于有效控制它们的感染至关重要。本研究利用生物信息学方法筛选了单增李斯特菌（AX10_RS05385）和沙门氏菌（SEEPA511_RS03120）的高特异性引物，并将其组合构建了双重qPCR系统。在此基础上，使用叠氮溴化丙锭（PMA）来弥补qPCR无法区分活菌和非活菌的缺陷，并探讨了PMA最佳处理条件（包括20 μM PMA、孵育时间：8 min、曝光时间：5 min）。加入脱氧胆酸钠（SD）可最大限度地提高PMA抑制非活菌扩增的效率。金纳米粒子（AuNPs）增强了qPCR系统约20%的荧光信号，从而建立了一种快速、高特异性和高灵敏度的AuNPs-SD-PMA-qPCR 检测技术。经6小时富集后，该方法可准确检测出乳制品中低至5 × 101 CFU/g的单增李斯特菌和沙门氏菌。因此，AuNPs-SD-PMA-qPCR在同时检测食品中的单增李斯特菌和沙门氏菌方面具有重要的应用价值。
图4 AuNPs- SD-PMA-qPCR性能考察。（A-B）通过 AuNPs-SD-PMA-qPCR鉴别活/非活的单增李斯特菌和沙门氏菌。（C）AuNPs-SD-PMA-qPCR 的特异性。（D-E）AuNPs-SD-PMA-qPCR对纯培养细菌的灵敏度。（F）双重AuNPs-SD-PMA-qPCR的熔解曲线分析。
https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2024.110711
