Sci. Adv.:光激活 CRISPR-Cas12a,用于单细胞水平细胞周期各阶段的 microRNA 成像

2024-08-12 06:14   美国  
一种与CRISPR-Cas12a结合的光核酸发夹结构被引入作为光诱导激活CRISPR-Cas12a LAC12a)机制的功模块,以实现对microRNA-21 miRNA-21)的荧光检测。LAC12可用于选择性检测细胞中的miRNA-21,同时实现不同细胞系中miRNA-21 的细胞内成像。LAC12a系可以对MCF-7 细胞不同细胞周期阶段的miRNA-21 进行成像。此外,集成在细胞中的LAC12可在单细胞水平上实现双光子激光共聚焦显微镜辅助、光刺激时空选择性激活CRISPR-Cas12a miRNA-21 成像机器,并评估 miRNA-21 在不同细胞周期阶段的相对表达水平

图1. 与 CRISPR-Cas12a (LAC12a) 机制耦合的反应模块的光激活脱保护示意图,用于检测细胞中 miRNA

图2. LAC12a 传感功能评价

图3. 不同细胞系中miRNA-21成像

图4. 应用 LAC12a 机制分析不同 MCF-7 细胞周期阶段的 miRNA-21

图5. 利用 LAC12a 机制在单细胞水平分析 miRNA-21


https://www.science.org/doi/10.1126/sciadv.adp6166

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