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真菌荧光染色检测
让|真|菌|无|所|遁|形
一
真菌和真菌病
真菌种类繁多,自然界估计有多达150万种,少部分对人体有害,可引起真菌病。根据真菌侵犯人体的部位,可分为浅部真菌病和深部真菌病。
深部真菌一般是指侵犯皮下组织和内脏,引起全身性感染的病原真菌或条件致病真菌。根据生物学性状不同,分为酵母样型真菌、酵母型真菌、丝状型真菌和双相型真菌等。浅部真菌主要侵犯机体皮肤、毛发和指(趾)甲,寄生和腐生于表皮、毛发或甲板的角质组织中,引起浅部真菌病。临床上最多见的浅部真菌为皮肤癣菌,又称为皮肤丝状菌,主要包括毛癣菌属、小孢子菌属和表皮癣菌属三个属,所引起的疾病又称癣。
临床真菌感染
真菌感染病情顽固,传播性强,且容易导致交叉感染,目前真菌发病率和死亡率也逐年增加,对人类健康的危害日趋严重,由于真菌感染的临床表现多种多样,缺少特异性临床表现,常误诊、漏诊,导致病情加重甚至危及生命。
二
真菌荧光染色原理
利用KOH溶液消解宿主细胞的同时,荧光素与真菌细胞壁上的葡聚糖、半乳甘露聚糖、几丁质、纤维素等多糖结合显微镜特定激发光波长下,使与结合上荧光素的细胞壁呈明亮的蓝白色荧光。
真菌荧光染色
三
与其他真菌检测方法区别
01
革兰染色
革兰染色镜检对真菌的分辨能力欠佳,镜下背景比较混乱,且菌丝本身不易着色或着色不均,真菌孢子和菌丝不易其他物质区分,如上皮细胞、革兰阳性菌、白细胞和红细胞等,需要检验人员根据经验判断。
02
KOH压片
阳性率低,准确率低,背景杂质干扰多。
03
真菌培养
培养法需要较长的时间进行检测,浪费了患者大量的时间导致患者配合积极性不高。
04
荧光染色法
染色液中的荧光增白剂能够特异地结合真菌细胞壁β-多糖成分,如几丁质、葡萄糖、纤维素等,在荧光显微镜镜下能清楚地观察到荧光标记真菌的形态特征,真菌孢子及菌丝立体感明显,与背景反差大,真菌菌丝结构清晰可辨,显著提高真菌镜检的敏感度。
四
真菌荧光检测的优势
01
操作简单、一滴成像,无需进行标本处理,即染即看,操作简单,速度快,明显缩短真菌镜检时间。
02
荧光染色后真菌呈亮蓝白色荧光,易于辨认,检出率高,提高真菌阳性率,避免假阳性,孢子少时也不易漏诊。
03
菌丝结构清晰,便于分类,有助于研究真菌学形态。
04
适用标本类型广泛,适用痰液、肺泡灌洗液、脓液、分泌物、尿液、粪便、胸水、腹水、组织、甲屑、皮屑和毛发等各种标本。
供稿:曾聖和,颜令