一例不规则抗体阳性干扰血型鉴定引发的思考

健康   2024-11-13 14:30   北京  



01

前言

血型鉴定是输血科一项最基本的工作,关系到输血安全。然而不规则抗体的存在有时会影响血型鉴定结果,使正反定型不相符,无法做进一步的鉴定,那么这种情况该如何处理呢?最近我们遇到一个不规则抗体阳性干扰血型鉴定结果的案例,引发了一些思考,与大家分享。



02

案例经过

患者,女,64岁,此次入院拟做“食管裂孔疝”手术,术前常规备血。查看患者既往史得知,该患者20年前做过肾移植手术,其后一直服用抗排斥药物至今,有输血史。

图1 血型鉴定

图2 不规则抗体筛查


如图1、图2所示,患者血型鉴定第四孔对照孔呈阳性(4+)(Ctl孔加入的是标准O细胞和患者血浆,正定型是B型RhD(+),反定型是O型,正反定型结果不相符,不规则抗体筛查结果阳性(I(0)II(4+)III(4+))。我们用试管盐水介质法复合了这两个试验,结果基本与卡式法相符,如下表所示:

表1 试管法与微柱法试验结果对比


结合患者有输血史的情况,可以推测患者可能存在不规则抗体;对照抗筛细胞格局表(图3),可能是抗C、抗e或者抗M。由于该不规则抗体干扰了血型反定型鉴定,我们都知道,抗M以IgM型为主,也就是说患者存在抗M可能性大,不排除合并抗C和抗e等IgG型抗体。


图3 抗体筛选细胞格局表


继续做了Rh血型鉴定和直接抗人球蛋白试验(图4、图5)。

图4 Rh分型鉴定

图5 直接抗人球蛋白试验


如图所示,患者Rh分型为CcEe,直接抗人球蛋白试验阳性(1+)。既然患者Rh分型为CcEe,也就排除了存在抗C和抗e的可能。

当然我们无法排除剂量效应导致的I号抗筛细胞结果假阴性。由于我们缺少这方面的经验,也没有其他鉴定手段,为进一步明确患者血型和不规则抗体的种类,我们将患者样本送往中心血站进行血型和抗体鉴定,中心血站给出的结论是:该患者为B型RhD阳性,NN,检出抗M和冷抗体两种不规则抗体,直接抗人球蛋白试验阳性(图6)。

图6 中心血站鉴定报告

至此,患者的血型和抗筛鉴定都有了明确的结论。



03

案例思考


得到这个结论后,我们总结经验,继续思考了以下问题:

1.抗M抗体从何而来?

MNS血型系统是继ABO血型之后,第二个被发现的血型系统。人血液中比较常见的是抗M抗体,多为自然产生,也有报道因输血或细菌感染而产生抗体。抗M以IgM类抗体为主,少部分是IgG类抗体[1]


2.不规则抗体是如何影响血型鉴定中Ctl和反定型格局的?

我们在手工加微柱凝胶卡时,Ctl孔加入的是标准O细胞和患者血浆,因为M抗原在人群中抗原表达率在77.19-81.36%[2],属于“高频抗原”,所以不排除标准O、A、B细胞上含有M抗原。抗M抗体多为盐水类抗体,如果红细胞上有M抗原,那么遇到抗M抗体后红细胞就会发生凝集,与该红细胞的ABO血型无关。所以不管是试管法还是卡式法,格局基本是一致的。

继续深入想一想,我们手工加微柱凝胶卡做血型鉴定时Ctl孔加入的是标准O细胞和患者血浆,而采用全自动血型仪血型鉴定时Ctl孔是采用患者自身红细胞悬液,也就是说,血型仪无法通过标准O细胞发现盐水类抗体。假设某患者ABO血型是O型,存在盐水类抗体(不存在自身抗体),那么仅从仪器上的微柱凝胶卡结果来看,正反定型相符,血型没有任何疑问,这样就造成了盐水类抗体的漏检[3]。因此手工法对照孔加入标准O细胞可以帮助我们检出盐水类不规则抗体。


3.我们能否验证冷抗体的存在?

患者检出抗M和冷抗体两种不规则抗体,抗M的鉴定需要更复杂的谱细胞组合,我实验室无法鉴定,那么我们能否验证冷抗体的存在呢?答案是肯定的。该批次抗筛细胞格局表告诉我们,I号抗筛细胞M抗原阴性,也就是说I号抗筛细胞为O型、M抗原阴性细胞,所以,I号抗筛细胞便可作为该患者的“标准O细胞”,用其与患者血浆混合,放入4℃环境静置10分钟,涂片镜下观察到细胞凝集的现象(图7),再将该试管37℃温浴10分钟,再次涂片观察,结果不出所料,原本凝集的红细胞又均匀分布了(图8),这样我们就验证了冷抗体的存在。

图7 4℃静置10分钟后

图8 37℃静置10分钟后


4.该患者DAT阳性的原因是什么?

直接抗人球蛋白试验(DAT)通常应用于检测体内是否存在已被不规则抗体或补体致敏的红细胞。DAT阳性往往是由于自身抗体、不规则抗体或者免疫复合物黏附在红细胞膜上导致。AIHA、 HDN、DIHA、应用血制品、器官移植、同种异型抗原或药物性抗原的刺激,都可能导致机体产生相应的抗体,从而引起DAT阳性的情况[4]。本案例中,血站虽然给出患者含有抗M抗体的结论,但没有注明是IgG型还是IgM型,亦或两者兼有。根据DAT阳性的结果,可以推测患者抗M抗体除了IgM型,可能还存在IgG型。


5.该患者的输血策略是什么?

《输血相容性检测标准》[5]4.3.2.6提到:抗体筛查阳性时,可进行抗体鉴定,选择相应抗原阴性的献血者与患者血液进行交叉配血,交叉配血结果无凝集无溶血可以输注。也就是说,该患者需输注ABO同型且M抗原阴性的红细胞。该患者手术后因贫血合并术后胸腔积血申请用血,中心血站为患者筛出B型M(-)红细胞,交叉配血试验相合,输注效果满意。



04

总结


因为平时较少遇到不规则抗体阳性的患者,相关经验较少,此例病例带给我们很多思考。在工作过程中遇到特殊病例应该多思考、多学习,夯实基础,积累经验,到下一次再遇到类似问题,就可以更从容地应对了。


参考文献

[1]胡丽华 临床输血学检验 [M].人民卫生出版社,2012

[2]红细胞意外抗体筛查与鉴定抗原谱构成中国专家共识起草编写组,马春娅,李小飞,等. 红细胞意外抗体筛查与鉴定抗原谱构成中国专家共识[J]. 临床输血与检验,2024,26(2):156-163. DOI:10.3969/j.issn.1671-2587.2024.02.002.

[3]谢惠益,周载鑫,杨玥,等. 抗-M抗体影响血型鉴定及对临床输血的影响[J]. 临床输血与检验,2022,24(6):716-720. DOI:10.3969/j.issn.1671-2587.2022.06.007.

[4]汤思,陈学杰. 直接抗人球蛋白试验阳性分型与输血疗效的相关性[J]. 吉林医学,2024,45(2):295-297. DOI:10.3969/j.issn.1004-0412.2024.02.013. 

[5] 输血相容性检测标准:WS/T 794-2022[S]. 2022.


内容来源 | 输血医视       

图片来源 | veer、ibaotu

排版 | jinbao

审校 | 金宝


涵庄检验视界
涵庄检验视界创立于2007年,原名检验视界网,以“打造检验信息交流综合平台,促进检验医学与IVD产业发展”为宗旨,主打内容为行业热点、讲堂直播、在线期刊、论坛会议、案例情景剧、科室巡礼、技术文章、品牌产品等。
 最新文章