问题一：如何选择“合适的”检测方法？什么样的检测方法算好？
特异性：检测方法能否准确区分目标物质与其他物质。比如说，HPLC，底物和产物同一时间出峰，无法分开，该方法也就是不合适，需要跟换流动相或其他方法，但并不是说HPLC就不行。
3.“合适的检测方法”。建立一个新检测方法比较麻烦也耗时间，可以通过查阅文献或国标等方法，直接获取检测方法。如果没有找到，可以查找性质相似物质的检测方法，总不可能都没有。
问题二：非精密仪器，是不是测出来不准？
有人说，我认为精密仪器检测的样品数据更加精确。这不是“认为”，而是肯定精确。但精密仪器价格相对也高，不可能每个实验室都有。退而求其次，其实选择其他方法也是可以的。
其实我们的底物不一定非要用水作溶剂，甲醇、乙醇、乙腈等有机溶剂都可以作为溶剂，尤其是万能溶剂DMSO。
那么，“检测”到底应该怎么做？
3.检测方法建立后，不要随意更改检测参数。
实例：需要检测某种蛋白酶的表达量和酶活。
1.实验目的：检测特定蛋白酶的表达量以及具体酶活大小。
2.灵敏度和特异性：选择SDS-PAGE或HPLC。
3. 实验条件和技术要求：确认实验室是否有SDS-PAGE或HPLC所需的设备和试剂，实验人员是否熟悉操作。
4. 成本和时间：SDS-PAGE成本较低且短时间就能完成，相关方法可以从参照SDS-PAGE电泳技术详细操作步骤和详解相关内容，但特异性高；HPLC设备昂贵，但操作相对简便，灵敏度高，可以参照了解一下高效液相色谱技术原理和应用相关内容。
5. 标准化和可重复性：查阅相关文献，选择HPLC使用方法。然后，先检测标准品，呈线性化后再检测样品。因检测的蛋白酶的酶活，可以通过底物的消耗或产物的生成来计算酶活。当然，SDS-PAGE可以直接检测蛋白酶的条带。
6. 安全性：在检测过程中，一定注意有毒有害试剂，尤其要注意有机试剂，并确保样本处理和废弃物处理符合安全标准。
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