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多模式层析:pH和盐双梯度洗脱赋能抗体高效纯化
MA Large Scale琼脂糖层析介质以高流速琼脂糖为基质,是一种多模式层析介质,同时具有阴离子交换、疏水和氢键作用力,专门针对单抗中度/精细纯化。它具有高流速、高载量及良好的化学稳定性和物理性能,可以缩短生产周期,提高生产效率,一步去除蛋白A、聚体、宿主蛋白、核酸和病毒。
应用案例:
样品:某 mAb rProtein A Seplife Suno洗脱液(pH7.83, cond:11.84mS/cm,conc:1.3145mg/ml)
多模式介质:MA Large Scale
线性流速:150cm/h
A液:50mM Na2HPO4-CA,pH8.0,cond 7.5mS/cm
B液: 50mM Na2HPO4-CA,1M NaCl,pH5.0,cond 92.7mS/cm
图2:多模式层析pH和盐双梯度色谱曲线图
某品牌抗体专用SEC分析柱分析
图三:SEC分析
分析方法:
分析柱:某品牌抗体专用SEC分析柱
(5μm,7.8×300mm)
流动相:20mM PB+150mM NaCl(pH7.2)
流速:0.8ml/min
检测波长:280nm
多模式层析pH和盐双梯度洗脱结果 | |
双梯度洗脱 | 0%=100%B液 24CV |
上样体积/抗体含量 | 18ml/34.7mg |
收集体积/抗体含量 | 15ml/33.5mg |
回收率 | 96.5 |
样品纯度(SEC纯) | 79% |
收集纯度(SEC纯) | 99% |
样品HCP残留(ppm) | 1236 |
收集HCP残留 (ppm) | 23 |
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