多模式层析——pH伴随盐双梯度洗脱赋能抗体高效纯化

文摘   科技   2024-09-20 10:28   江苏  


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多模式层析:pH和盐双梯度洗脱赋能抗体高效纯化


MA Large Scale琼脂糖层析介质以高流速琼脂糖为基质,是一种多模式层析介质,同时具有阴离子交换、疏水和氢键作用力,专门针对单抗中度/精细纯化。它具有高流速、高载量及良好的化学稳定性和物理性能,可以缩短生产周期,提高生产效率,一步去除蛋白A、聚体、宿主蛋白、核酸和病毒

应用案例:

样品:某 mAb  rProtein A Seplife Suno洗脱液(pH7.83, cond:11.84mS/cm,conc:1.3145mg/ml)

多模式介质MA Large Scale

线性流速:150cm/h

A液:50mM Na2HPO4-CA,pH8.0,cond 7.5mS/cm

B液: 50mM Na2HPO4-CA,1M NaCl,pH5.0,cond 92.7mS/cm

图2:多模式层析pH和盐双梯度色谱曲线图


某品牌抗体专用SEC分析柱分析

图三:SEC分析

分析方法:

分析柱:某品牌抗体专用SEC分析柱

(5μm,7.8×300mm)

流动相:20mM PB+150mM NaCl(pH7.2)

流速:0.8ml/min

检测波长:280nm


多模式层析pH和盐双梯度洗脱结果
双梯度洗脱0%=100%B液 24CV
上样体积/抗体含量18ml/34.7mg
收集体积/抗体含量15ml/33.5mg
回收率96.5
样品纯度(SEC纯)79%
收集纯度(SEC纯)99%
样品HCP残留(ppm)1236
收集HCP残留 (ppm)23
多模式层析MA Large Scale 吸附-洗脱模式下用pH和盐双梯度洗脱,比单pH梯度或单盐梯度洗脱有着更高的分辨率。

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