全能型一步法同源重组mix
COOLABER
载体是分子生物学研究的基础工具，是科研人员进行研究的重要武器。曾经，载体构建一直离不开限制性内切酶和DNA连接酶的帮助。用限制性内切酶产生黏性末端，并通过碱基互补配对和DNA连接酶缝合，连接两个甚至更多片段的克隆方法，是载体构建的经典方案。近年来，随着分子生物学技术的发展，“无缝克隆”逐渐受到越来越多研究人员的青睐。
为什么选择无缝克隆？无缝克隆与传统酶切克隆方式比较：
无缝克隆相比于传统酶切克隆的优势在于：
灵活、快速、高效、省时省力、成功率高。
今天，Coolaber给大家带来一款基于“无缝克隆”原理的一步法同源重组mix，可作为实验室的常备载体构建工具。
PART 1
产品基本信息
一、产品简介：
CR101 Visclone Universal One Step Cloning Kit（通用一步法克隆试剂盒）
Visclone Universal One Step Cloning Kit是Coolaber基于同源重组原理开发的一款简单、快速、高效的无缝克隆试剂盒，可快速将含有载体末端重叠区域的插入片段定向克隆至线性化载体的任意位点。
使用任意方式将载体进行线性化，在插入片段正/反向PCR扩增引物的5’端引入线性化载体上的15 ~ 25 nt末端序列，通过重组酶的作用使得具有重叠区域的片段和载体最快在50℃，5 min内重组，完成定向无缝克隆。
本产品为通用型mix，可以兼容1~5个DNA片段的重组反应，2×Visclone Universal Cloning mix中添加的辅助因子和优化的反应体系使产品具有更高的阳性率和兼容性。
二、产品内容：
*试剂盒提供的pUC19 Control Plasmid和Control Fragment可以作为阳性对照用于排除实验其它操作因素的影响。
三、产品特点及优势：
1. 快速：单片段重组最低只需5 min，2-5个片段重组最低只需15 min。
2. 兼容性强：适用于1-5个片段的快速无缝克隆、定点突变和高通量克隆等实验。
3. 灵活：不受酶切位点的限制，可将片段定向克隆至载体上任意位点。
4. 无缝：插入位点无需引入不需要的碱基序列，真正实现无缝克隆。
PART 2
产品实验使用
一、实验流程/原理示意图：
图 单片段重组
图 多片段重组
二、实验影响因素：
三、产品使用效果：
1.单片段重组阳性率接近100%
图：使用Visclone Universal One Step Cloning Kit（CR101），选取不同长度片段（1、2、2.5、5Kb）分别与与线性化载体（约3.9Kb）进行重组。连接反应条件：50℃ 5min。5Kb片段反应50℃ 15min。
2.多片段重组阳性率接近90%
图：使用Visclone Universal One Step Cloning Kit（CR101），将多个片段（2、3、5个）分别与与线性化载体（约3.4Kb）进行重组。连接反应条件：50℃ 15min。
PART 3
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