单杂酵母菌p和结果分析
酵母是一种重要的基因工程宿主菌，但是由于其细胞壁结构复杂牢固，质粒拷贝数低的特点，导致普通菌落PCR鉴定酵母细胞内外源基因的成功率较低。
常见酵母菌P解决方案
1）煮沸冷冻法：优点便宜，缺点成功率低、不稳定；
2）酶解法：优点稳定性好，缺点时间长；
3）碱裂解法：优点便宜，缺点产物对PCR有一定的抑制作用，常出现弥散条带；
4）直扩法：优点方便，缺点依赖于高保真酶，对于模板量要求极高，重复性差；
5）提质粒：优点成功率高，缺点步骤复杂。
推荐使用coolaber的SK2420和SK2422试剂盒，采用了酶解+化学裂解的方法，能有效提高破壁效率。另外，高保真PCR Mix，比普通Mix兼容好，扩增效率高。SK2420酵母阳性克隆快速检测试剂盒，用于酵母杂交筛库的阳性克隆鉴定（AD载体）。SK2422酵母基因组菌落PCR试剂盒，用于Y1HGold-pAbAi系统单杂阳性诱饵菌株鉴定（pAbAi载体）。
酵母杂交筛库的阳性克隆鉴定（AD载体）结果分析
1.筛库得到的条带大小是不固定的，主要与诱饵蛋白、文库物种和建库方案有关，一般情况下，文库片段长度范围：650-3000bp，平均长度>1200bp。
2.有多条电泳条带的单克隆（含有多个质粒的转化子），需要在SD/-Leu/AbA筛选培养基上重复划线培养2-3代，然后通过菌落PCR的方法选出具有单个质粒的克隆。
3.对于较短的条带，可能是引物二聚体或空载载体导致的，可以舍弃。
4.长度完全一致的条带可能是重复的基因，根据测序结果再次判断。
单杂阳性诱饵菌株鉴定（pAbAi载体）结果分析
