作者|杨丽梅， 王春晖
单位|惠州市中心人民医院检验中心
梅毒螺旋体（TreponemaPallidun，TP)属于密螺旋体属苍白螺旋体苍白亚种，是引起人类梅毒的病原体。常见的传播途径有性接触传播、垂直传播和血液传播。可分为后天获得性梅毒和胎传梅毒，后天获得性梅毒又分为早期和晚期梅毒。
早期梅毒指感染梅毒螺旋体2年内的梅毒，包括一、二期和早期隐形梅毒，晚期梅毒的病程≥2年[1]。近年来梅毒发病率呈逐年上升趋势，如果没有及时得到规范性治疗，梅毒将引起人体多系统多器官的损害，甚至危及生命。因此，梅毒的早期检测对于控制梅毒传播和及时治疗具有重要意义。
由于梅毒螺旋体很难在体外培养，目前，实验室诊断主要为血清学检测，包括特异性抗体和非特异性抗体检测。现将本院发现的1例“悄悄转阴的梅毒螺旋体特异性抗体”的病例报道如下。
患者，男，30岁，皮肤科门诊患者，当日开具甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）检测。TRUST和TPPA均为阴性，TPPA结果与历史结果不相符（2024.02.23和2024.04.16的TPPA结果均为阳性）。触动复检规则，查看标本性状，无明显黄疸及溶血、脂血；检测过程无异常，当日质控在控。立即新溶了同一批号的试剂将标本（编号为11）进行复检，结果仍为阴性。
另外，用化学发光法复查，COI是0.074，结果为阴性；用胶体金法复查，试纸条显示弱阳性。为了排除患者使用其他人的诊疗卡就诊、采血管质量问题、抽错血等因素影响，致电患者重新抽血复查。同时咨询接诊医生患者的相关症状，得知患者有不洁性生活史，外院检查TRUST阴性、TPPA阳性，注射苄星青霉素进行治疗。
第二天患者重新抽血，使用新批号试剂和另一厂家的试剂进行检测，标本编号为12号，结果仍为阴性。同时，为了排除试剂问题，对粒子进行验证试验，阳性对照做到1:320的孔，阳性样本重复3次检测，每个测试都做到1:80。
另外，也用化学发光法和胶体金法进行检测，化学发光法的COI为0.072，结果为阴性，胶体金法仍为弱阳性。考虑该患者接受治疗，于是发报告“阴性”，并备注建议做蛋白印迹试验。
TPPA试剂是将梅毒螺旋体（Nichols株）的精制菌体成分包被在人工载体明胶粒子上，和样品中的梅毒螺旋体抗体进行反应发生凝集，产生粒子凝集反应（Particle Agglutination Test，PA法），明胶颗粒为玫瑰红色，便于肉眼观察结果。由此可以检测出血清中的梅毒螺旋抗体，并且可用来测定抗体效价。
TPPA检测结果的稳定性好，检出率高，抗干扰能力强，是目前国内外公认的梅毒血清确认试验。TPPA阳性说明机体处于感染或曾经感染，不能用于评定疗效或疾病的活动性。当人体感染梅毒螺旋体后，体内一般会终身存在抗体，但有相关文献报道[2]，早期梅毒经过规范性治疗2年后，有28.57%患者的梅毒螺旋体抗体试验转阴，早期及时的诊断、有效的治疗可以使抗体消失。但其作用机制尚不清楚。
TPPA不需要特殊设备，靠肉眼观察，本案例的粒子有极轻微的凝集反应，但尚未达到弱阳性的标准。TPPA自动化检测的难度高，无法储存原始数据，所以无法追踪2月份和4月份那两次的检测结果。
胶体金法是用来检测梅毒抗体的快速试验之一，具有操作简单的特点，但是特异性差。胶体金法阳性预测值与阴性预测值分别为57.14%及95.92%[3]。
梅毒螺旋体化学发光法是采用双抗原夹心法原理，将标本、生物素化的梅毒螺旋体特异性重组抗原和梅毒螺旋体特异性重组抗原的钌（Ru）标记的复合物一起孵育，形成抗原抗体复合物。加入包被链霉亲合素的磁珠微粒后，上述复合物通过生物素与链霉亲合素相互作用与固相结合。反应液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定，根据阈值判定结果。化学发光法稳定性好，自动化程度高，适合大批量人群筛查。
梅毒螺旋体血清学试验偶可出现生物学假阳性反应。急、慢性疾病、自然组织损伤等可能导致假阳性，常见的疾病因素有系统性红斑狼疮、麻风病、疟疾、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、肿瘤、其他螺旋体疾病等；常见的生理性因素有孕妇和老年等[4]。
另外，试验操作过程也可能导致假阳性:TPPA试验的微量反应板被刮花、孔内有异物、静置过程中出现震动等；84消毒液等强氧化剂能引起发光底物液发生反应，导致结果误判。含有高浓度红、白细胞的样本、服用了含有免疫球蛋白血液制剂的样本、高血脂、溶血、微生物污染样本及反复冻融或者热灭活后的样本均会影响检测的准确性，导致错误的结果。
无论哪一类抗体实验，对不同病程患者的检测都存在局限性，要评估检测试剂的性能。由于梅毒疾病的复杂性和特殊性，应根据诊疗需求、技术能力、公共卫生任务等因素，制定合理的检测流程，采用多种技术联合检测，筛选一种试剂作为日常检测试剂。储备另一种与日常检测试剂同等灵敏度的试剂，当待检标本处于临界/灰区值时，进行复测和确认，进行方法学上相互补充。
另一方面积极与临床医生沟通，了解患者病史资料，加强结果的分析与解释工作，提高实验室的检测质量、临床诊疗服务和降低误诊和漏诊、减少医疗风险、提高公共卫生安全。
点评专家：王春晖
本文对常见梅毒抗体检测的几种方法学进行了比较，指出了各种方法的优缺点和临床应用情况。由于梅毒检测结果的重要性及社会特殊性，实验室应制定合理的检测流程，对可疑结果采用多种技术联合检测进行复核和确认，提高诊断的正确率。
参考文献
[1]中国疾病预防控制中心性病控制中心,中华医学会皮肤性病学分会性病学组,中国医师协会皮肤科医师分会性病亚专业委员会.梅毒、淋病和生殖道沙眼衣原体感染诊疗指南（2020年）[J].中华皮肤科杂志,2020,53(3):168-174.
[2]党倩丽,冯捷,张小艳,等.梅毒螺旋体特异性抗体对梅毒早期诊断和治疗的评价[J].临床皮肤科杂志,2005,34(2):90-92.
[3]任蕾,耿利军,吴超利,等.1050例CMIA法检测梅毒抗体弱阳性标本结果分析[J].国际免疫学杂志,2020,43(4):389-392.
[4]中华人民共和国国家卫生健康委员会.梅毒非特异性抗体检测指南,中华人民共和国卫生行业标准.WS/T 491-2024.
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编辑：李玲 审校：陈雪礼
