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研究背景
卵巢功能不全（POI）是一种严重影响女性健康的生殖疾病，在全球范围内发病率和患病率呈上升趋势。卵巢储备功能低下和卵母细胞质量差是POI患者妊娠率低的最重要原因。最新分析显示，女性POI发生率高达3.7%；而且，累计发病率也逐渐上升。与高龄女性不同，POI患者有强烈的怀孕欲望。因此，迫切需要找到一种新的有效策略来解决 POI 女性的生殖挑战。
无细胞脂肪提取物（CEFFE）是一种无细胞液体成分，将脂肪组织乳化并离心，去除油脂、细胞和细胞外基质，得到含有TGFβ、VEGF、EGF等生长因子的提取物，这些与干细胞产生的因子类似。CEFFE具有免疫原性低、来源丰富等优点。先前的研究表明，CEFFE可以促进细胞增殖和血管生成，并抑制皮肤再生中的细胞凋亡，这表明其对组织修复和再生具有潜在作用，但其对卵巢损伤的作用尚不清楚。于是研究者为探讨CEFFE对POI的治疗和转化潜力，构建POI小鼠模型，探讨CEFFE恢复卵巢功能和生育能力的有效性、安全性及其分子机制，为POI的治疗提供新途径。
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研究结果
首先研究者通过给小鼠腹腔注射不同浓度的环磷酰胺和白消安，建立POI小鼠模型，然后进行POI各项指标分析（AMH，FSH，E2和各级卵泡数），证明建模完成。为了评价CEFFE对POI小鼠的有效性，检测了不同时间点的体重、卵巢重量、动情周期、性激素和卵巢形态，发现CEFFE对POI小鼠具有治疗效果。
接下来，进一步检查小鼠的生育能力。首先，收集卵母细胞并进行体外培养。CEFFE治疗后，回收的卵母细胞明显增加。此外，在2细胞胚胎和囊胚的比例中也观察到了类似的结果。这些结果表明CEFFE可以促进胚胎的发育。统计产仔数发现POI小鼠的产仔数比对照组少，CEFFE治疗后产仔数略有增加。这些数据显示了CEFFE 对POI小鼠生育力的影响，包括取卵数、胚胎发育和后代，并表明CEFFE 可以恢复POI小鼠受损的生育力。
为检测CEFFE的安全性，将接受CEFFE治疗的小鼠通过检查癌症标志物PTEN和P53来评估CEFFE的卵巢致癌性，结果表明CEFFE没有导致肿瘤发生的副作用。
接下来研究者探究了CEFFE在组织水平（包括髓质和皮质）对卵巢的影响，髓质主要由血管和淋巴管组成。通过评估 CD31（血管标记物）来观察髓质中的血管生成。发现CEFFE治疗后血管生成增加。卵巢皮质由形态各异的卵泡组成，卵泡主要由卵母细胞和颗粒细胞（GC）组成。结果发现CEFFE增加卵泡增殖并减少颗粒细胞凋亡。
为进一步探究CEFFE对颗粒细胞的影响，使用KGN细胞系作为体外模型，研究CEFFE对人卵巢颗粒细胞的影响。结果发现CEFFE抑制CTX诱导的KGN细胞凋亡并改善线粒体功能。
为探讨CEFFE如何发挥其对GCs的抗凋亡作用。研究者对卵巢GC进行RNA测序。使用 GO和KEGG分析确定改变的途径。数据显示“生长因子刺激的细胞反应调节”、“跨膜受体蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶信号通路”和“BMP刺激的细胞反应”在GO分析富集。KEGG通路分析显示TGFβ、TNF、Ras、PI3K-Akt和Hippo信号通路均被富集。正如之前报道的，这些途径对于GC的功能个卵泡生成至关重要。
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参考文献
Mengyu Liu, Dan Zhang, Aijun Zhang, et,al. Cell-free fat extract improves ovarian function and fertility in mice with premature ovarian insufciency. Stem Cell Research & Therapy. 2022;13:320.
文献分享丨范志浩 审核丨 侯栋
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