在过去，bsAbs的发现流程通常是先筛选出两个单抗，然后在后期将它们“拼接”成双特异性抗体。这种方法虽然简单，但存在几个明显的缺点：1）多样性受限：由于bsAbs的生成通常只在后期进行，能够测试的分子数量有限，导致筛选出的bsAbs多样性不足。2）资源消耗大：bsAbs的表达、纯化和分析过程复杂，尤其是当需要处理大量分子时，资源消耗巨大。3）时间成本高：由于需要在后期进行多次工程优化，整个发现流程的时间被大大拉长。
因此，对于双抗的筛选，开发高通量技术（HTP）很有必要，合适的HTP可以使研究人员在早期阶段生成大量的bsAbs，并进行快速筛选，从而大大提高发现效率。
经过近10几年的发展，目前双特异抗体的筛选已经逐渐成熟，并且有多种不同的方法，在之前的文章的中我们也做过详细的介绍《双特异抗体高通量筛选最强音！》，这些技术大致上可以分为三类“
1） 组合方法，快速生成bsAbs矩阵：组合方法是HTP生产的核心策略之一。通过将不同的抗体片段进行组合，研究人员可以快速生成大量的bsAbs矩阵。这种方法不仅减少了DNA质粒和蛋白质表达的数量，还大大简化了纯化步骤。
2） 化学偶联，高效连接抗体片段：化学偶联是另一种高效的bsAbs生产方法。通过使用特定的化学反应，研究人员可以将两个抗体片段快速连接起来，生成稳定的bsAbs。近年来，点击化学等新型偶联技术的应用，进一步提高了bsAbs的生产效率和纯度。
3） 自动化与质谱分析，大规模生产的“利器”：自动化技术和质谱分析的结合，使得大规模bsAbs生产成为可能。通过自动化平台，研究人员可以快速完成从DNA构建到蛋白质表达的整个流程，而质谱分析则能够高效地验证bsAbs的纯度和结构。
总结
双特异性抗体的高通量生产技术，正在为生物制药领域带来革命性的变化。通过早期筛选、组合方法和自动化平台，研究者能够更快、更高效地发现和优化bsAbs，加速新药的研发进程。在这些双抗筛选技术中，Genmab的Duobody平台无疑是最成功的，基于该平台技术，目前已经有多个双抗获批上市，如强生的EGFR/cMET双抗，BCMA/CD3，GPRC5D/CD3，艾伯维的CD20/CD3双抗，而且目前也有多款双抗处于临床开发后期。另外，值得注意的是，该平台技术专利可能于2030年左右过期，因此现在利用该技术进行双抗的筛选也不失为一个较好的选择。
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