1.CO₂的逸出
原因：培养基在配制或储存过程中可能溶解了空气中的二氧化碳（CO₂），形成碳酸（H₂CO₃），这会略微降低pH。过滤过程中，液体暴露于空气或经过滤膜时，CO₂可能因温度变化或液体表面积增大而逸出，导致碳酸浓度下降，pH升高。 示例：类似于碳酸饮料开瓶后CO₂释放导致pH上升的现象。
2.缓冲成分的吸附或损失
原因：培养基中的缓冲成分（如磷酸盐、碳酸氢盐或有机酸）可能被滤膜吸附。例如： 磷酸盐缓冲液：滤膜可能吸附部分磷酸根离子（HPO₄²⁻/H₂PO₄⁻），打破缓冲平衡。 有机酸（如谷氨酸、柠檬酸）：带负电的酸根可能被带正电荷的滤膜（如某些尼龙膜）吸附，减少酸性物质浓度，导致pH上升。 示例：若使用未预处理的滤膜，吸附效应可能更显著。
3.温度变化
原因：过滤过程中，若培养基温度升高（如从冷藏状态升至室温），可能影响CO₂溶解度和缓冲体系的解离平衡，间接导致pH上升。
4.滤膜材质的影响
原因：某些滤膜材质（如聚醚砜、尼龙）可能带有表面电荷，与培养基中的离子发生非特异性吸附，改变离子浓度比例。例如，吸附H⁺或有机酸离子会直接导致pH升高。
如何避免pH变化？
预冲洗滤膜：用少量培养基预过滤，使滤膜吸附饱和后再收集滤液。 控制CO₂暴露：在密闭系统中过滤，减少CO₂逸出；或使用含碳酸氢盐的培养基时，在5% CO₂环境下平衡。 选择合适滤膜：使用低吸附性滤膜（如PVDF或PTFE材质），或确认滤膜与培养基成分兼容性。 调整配方：增加缓冲能力（如HEPES缓冲液），或过滤后重新测定并微调pH。
验证方法
对比过滤前后的培养基成分（如离子浓度、有机酸含量）。 测量过滤前后的溶解CO₂含量。 测试不同滤膜材质对pH的影响。
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