往期精彩回顾
大家好！欢迎收看由郑州大学第三附属医院主办的《疑难病例产前诊断沙龙》，本期是我们沙龙的第181期。首先，介绍一下今天的主持嘉宾和主讲嘉宾，他们分别是主持嘉宾：河南省妇幼保健院 ( 郑州大学第三附属医院）医学遗传与产前诊断中心住院医师 李娟；主讲嘉宾：河南省妇幼保健院 ( 郑州大学第三附属医院）医学遗传与产前诊断中心公卫主管医师 李亚丽。
自然流产的遗传因素
自然流产是指由于非人为因素导致妊娠在28周前终止且胎儿体重<1000g的流产;自然流产的发生率为15~25%，80%以上为≤12孕周的早期流产；早期流产约有50-60%是由染色体异常导致的。
2~8%的孕妇会发生复发性流产，女性年龄、既往流产次数是再次流产的两个独立危险因素
染色体异常是导致自然流产的重要因素。
染色体的数目异常或结构畸变，都称为染色体异常。染色体异常是导致自然流产、不孕不育、胎儿多发畸形、新生儿/儿童表型异常等的重要原因。胚胎染色体异常的分类主要包括：
胚胎染色体异常
以非整倍体最多见
研究发现，1953例流产组织样本中，染色体非整倍体最常见，发生率为44.55%。非整倍体形成主要原因是：
1、卵母/精原细胞第一次减数分裂中，同源染色体的错误分离。
2、文献数据表明，胚胎非整倍体的增加可能与功能性卵巢储备功能丧失相关。
3、随着女性年龄的增长，染色体分离错误的风险逐渐增加，生育力及卵泡质量下降。因此，大约 35 岁开始女性流产率及胎儿畸形率风险增加
夫妻染色体异常
易导致复发性流产
3%~8%的RSA夫妇中至少有一方存在染色体异常，其中90%以上为结构异常，常规核型没有发现异常的RSA夫妇中染色体异常携带者发生率高达11%~14%。
染色体结构异常包括相互易位、环状染色体、染色体插入、倒位等，其中以平衡易位(1/18)和罗氏易位(1/6)最为常见。
1
染色体罗氏易位
罗氏易位是通常发生在人类近端着丝粒染色体DG组之间或组内的一种平衡易位形式。
罗氏易位携带者的夫妻生育:1/6正常;1/6罗氏易位携带;2/3各种染色体异常。
若胎儿为13、14、15、21、22号染色体非整倍体，需考虑夫妻存在罗氏易位的可能(遗传因素)，建议夫妻染色体核型检查。同源染色体的罗氏易位，无正常子代。
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染色体平衡易位
平衡易位携带者的夫妻生育:1/18正常1/18平衡易位携带，8/9各种染色体异常。
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染色体倒位
倒位携带者的夫妻，遗传效应主要决定于片段长短及其所含基因的致死效应，生育:1/4正常;1/4倒位携带;1/2各种染色体微缺失微重复异常。
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结构异常-致病性拷贝变异
胚胎染色体断裂、重排形成CNVS异常，大片段异常导致大量基因剂量改变，影响基因表达胚胎不能存活。
片段“末端缺失+末端重复”型结构异常导致胚胎无法存活，提示夫妻一方可能为染色体平衡易位或倒位携带者(遗传因素)，建议夫妻染色体核型检查。
QF-PCR的背景介绍
荧光PCR-毛细管电泳，或称为QF-PCR(Quantitative Fluorescence PCR)，是一种相对荧光定量测定用于多种片段分析应用的技术，需要对多份样本进行准确的峰型比较(Size、Height/Area)。这种技术的应用包括使用短串联重复序列(STR)或SNP进行的杂合性丢失(LOH)筛选、染色体倍型检测以及染色体缺失检测。
生物学原则:人二倍体、STR多态性、孟德尔遗传。
QF-PCR基于PCR扩增和毛细管电泳分离技术，通过定性、定量分析STR的多态性。4个小时内能诊断出99.2%~100.0%目标染色体(21、18、13、X和Y等5种染色体)的非整倍体异常。除此之外，还能检测出三倍体和母体细胞污染，以及根据STR等位基因的个性化信息判别多余染色体的父亲或母亲来源，为临床提供更多的遗传信息。
QF-PCR
毛细管电泳平台
ThermoFisher系列毛细管凝胶电泳仪：
主要应用领域：
1、法医DNA分析（Fragment analysis）；
2、医学诊断/基因测序（Fragment analysis）（Sanger sequencing）。
特点：
1、支持多色荧光（五色/六色），可以充分发挥多重PCR的优势；
2、中高通量（样本通量/位点通量）；
3、单碱基分辨率，支持Sanger测序以及片段分析中的微变异分析。
QF-PCR
临床应用场景
QF-PCR
在流产物检测的应用
QF-PCR技术应用
及咨询的相关问题
1、关于染色体三体的诊断提示：
超过两条染色体的STR出现三等位基因型，其他染色体的STR检测无与之矛盾的结果，提示可能存在染色体三体，可采用其他产前诊断技术进一步验证。
2、关于三体嵌合体的诊断：
当某染色体上有单个或多个STR出现多余等位基因（三体最多出现3个等位基因），应注意观察是否存在嵌合体。QF-PCR技术一般可检测出嵌合比例在20%及以上的三体嵌合体。
3、QF-PCR技术检测结果的应用：
QF-PCR技术检测结果异常，可单独出具诊断报告，以便临床早期处理异常胎儿；QF-PCR技术检测结果未显示异常，不排除存在目标染色体以外的其他染色体异常，应在报告中告知QF-PCR检测的局限性和存在其他染色体异常风险等情况。
4、产前遗传咨询的相关问题：
QF-PCR技术的优势在于快速、高通量检测、适用于多种标本类型，在产前诊断领域有广泛的适用性。但QF-PCR技术为目标靶向检测，存在技术固有的局限性，表现在：
（1）不能检测出目标范围外的其他染色体异常；
（2）无法可靠地检测出低于 20% 的嵌合体。在进行QF-PCR技术检测前应告知孕妇QF-PCR技术的优势与局限性，并签署知情同意书，在检测后应结合孕妇的临床情况（如胎儿超声检查情况）进行遗传咨询。
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《胎儿心律失常的产前诊断及管理》| 产前诊断疑难病例交流沙龙第176期精彩回顾及分享
温馨提醒
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门诊时间：周一至周日全天上班，周一至周五午间门诊；
穿刺时间：周一至周五全天及周六上午；节假日另行安排；
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