人类首个DNA病毒反向遗传学系统的建立

学术   科学   2024-04-14 23:15   北京  

1976年,S P Goff和P Berg建立人类历史上首个DNA病毒的反向遗传学,该研究成果发表在Cell期刊上,为病毒的反向遗传学拯救打开了序章。

作者先用HpaⅡ和BamHⅠ切除了SV40 DNA载体(SVGT-1)上的LATE区。

然后用EcoRⅠ和HIndⅢ酶切获得了λ噬菌体的基因片段,包括ori(λ DNA复制的起始区)、两个结构基因CⅡ和cro,以及4个转录的启动子序列。

λ噬菌体的基因片段的基因片段插入SVGT-1的LATE区,构建了重组病毒,命名为λ-SVGT-1。将λ-SVGT-1转染CV-1猴肾细胞,同时感染tsA58,在41℃培养下能够获得重组λ-SVGT-1病毒,滴度可达2500 pfu/ug DNA。

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智者不学生物
中科院博士,讲解-生物学、生命科学-基础理论和实验方法,文章套路解读,分享protocol、软件、电子书和实用网站
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