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WB凝胶——固定胶VS梯度胶
学术
2024-04-05 21:37
安徽
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固定胶
固定胶
指
固定聚丙烯酰胺浓度的胶
,如7.5%、10% 的固定胶。
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梯度胶
梯度胶
则是指胶料本身在某一维度(通常为浓度)上形成梯度分布的胶料,其特点是
在凝胶中存在
梯度浓度
的成分
。这种梯度胶可以用来分离不同大小或不同电荷的蛋白质,因为在梯度胶中,蛋白质会根据其大小或电荷的不同在凝胶中移动到不同的位置。这样可以实现更精确的蛋白质分离和检测。如4-12%、4-20%的梯度胶。
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3
固定胶VS梯度胶
3.1 固定胶的优缺点
优点:
①稳定性好:固定胶通常由聚丙烯酰胺或琼脂糖等材料制成,具有较好的稳定性,不易变形或破裂。
②价格低廉:固定胶的制备成本较低,适合大规模生产和使用。
③制备方便,操作简单。
缺点:
① 分辨率较低:固定胶的孔隙结构相对固定,不易调整,导致分辨率较低,不适合分离分子量相近的物质。
②分离效果受限:固定胶的孔隙大小固定,不适合分离过大或过小的分子。
3.2 梯度胶的优缺点
优点:
①分辨率高:梯度胶可以根据需要调整成分浓度,使得凝胶的孔隙大小呈梯度变化,
在蛋白质不能通透的孔径附近对蛋白有浓缩作用
,从而提高分辨率。
②分离效果好:梯度胶适合分离分子量相近的物质,能够更好地分离不同大小的分子。
③适用范围广:梯度胶适用于各种凝胶电泳技术,如蛋白质电泳、DNA电泳等。
缺点:
① 制备成本高:梯度胶的制备相对复杂,需要精确控制不同成分的混合比例,成本较高。
②使用复杂:梯度胶的使用相对固定胶更为复杂,需要根据实验需要调整梯度浓度,操作较为繁琐。
综上所述,
固定胶适合一般的凝胶电泳实验,操作简便,成本低廉
;而
梯度胶
适合需要
高分辨率和分离效果
的实验,虽然制备和使用较为复杂,但
能够提供更好的分离效果
。在选择使用哪种胶体材料时,可以根
据实验需要和实验条件来进行选择。
今天的分享就到这里啦!See you next time.
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