吐了!羟基磷灰石助铁人完成三项?

文摘   科学   2024-08-12 18:26   上海  
今天凌晨巴黎奥运会已顺利闭幕。在这届男子铁人三项比赛中,多名选手冲刺过终点后感到不适,伴随一些选手的呕吐(不过这大概率是由于体力耗尽)。此前法国陆续投入了15.5亿美元去改造治理塞纳河,但结果还是无法让人满意:铁人三项比赛因为塞纳河大肠杆菌含量超标,比赛延期一天。
上世纪90年代的一项研究将塞纳河列为当时全球重金属含量最高的河流之一。1923年,出于安全考量,法国政府下令禁止在塞纳河游泳,今年恰逢“禁泳令”百年的期限。

河道治理需要长久、持续的投入,除了清淤疏浚、截污纳管及生态修复等工程,而用可吸附杂质的物质,例如活性炭吸除污染物、微生物,这种方式简单便捷,成本也较低。除了活性炭,羟基磷灰石(Hydroxyapatite)也是一种吸附能力极强的无机物,常用于蛋白纯化、环境治理等领域。

那么,羟基磷灰石的吸附能力是源于什么?一个能够清洁河道的物质用于医美注射时,需要注意些什么呢?


羟基磷灰石河道修复

如我们之前文章介绍(点击阅读:羟基磷灰石文章合集)羟基磷灰石是一种生物相容性极高的材料,是钙磷灰石的一种天然矿物形式,可以在火成岩、变质岩和土壤中找到,也可以通过人工合成,其成本较低,经济价值很高。

羟基磷灰石的功能基团由带正电荷的钙离子(Ca2+)和负电荷的磷酸根(PO43-)组成,这种不同的电荷使得羟基磷灰石具备很好的吸附能力(如下图):

  • 阳离子交换作用:当目标物带正电荷时候,可以与PO43-结合,而与Ca2+是相互排斥,这种作用主要是阳离子交换作用。这种阳离子交换作用会受到洗脱缓冲液中的中性盐浓度(如氯化钠)或者平衡液中磷酸盐浓度的影响。这种作用随着pH的增高也会相应减弱。因此,增加盐、磷酸盐的浓度或增高pH,都会减弱目的蛋白与PO43-之间的相互作用;

  • 金属亲和:Ca2+可以与蛋白或其他物质(如核酸)表面的羧基簇或磷酸基团形成配位键,而同时与PO43-相排斥。这种结合方式作用力是一般离子交换的15-60倍。所以这种结合方式受离子的影响比较小,对NaCl不敏感。而且这种作用力随着离子强度会增加金属亲和力,原因是由于离子强度的增加屏蔽了分子表面功能基团与PO43-之间的相互排斥作用。这种结合方式可以通过磷酸钠进行洗脱。

这种环境友好、经济实惠的无机材料在一定形态下具有优异的化学稳定性、离子交换性和金属螯合能力,在处理污水过程中不会造成二次污染,近年来在水处理方面受到了较多关注。如下图,展示了羟基磷灰石不同的机制来捕获污染物。

值得关注的是,羟基磷灰石对大肠杆菌同样有很强的吸附作用,有学者对比了大肠杆菌在羟基磷灰石、活性炭和聚合物材料(聚氯乙烯和聚氨酯)的粘附性。

下图展示了大肠杆菌培养45分钟后羟基磷灰石活性炭聚氯乙烯(PVC) 和 聚氨酯(PU)表面的扫描电子显微镜图像,粘附在羟基磷灰石的大肠杆菌的粘附数量约等于活性炭,显著高于其他聚合材料,材料表面的亲水性可能是决定这种粘附行为的主要因素。

除了大肠杆菌等细菌外,工业污水也对河流湖泊等水体,甚至水产品产生影响,其主要污染物包括重金属、有机污染物等。如我们上文所述,羟基磷灰石的OH-Ca2+PO43- 等离子具有良好的离子交换性能,根据目标物的不同带点属性,能吸附重金属和有机染料等污染物。

有研究表明,通过制备多孔结构的纳米级羟基磷灰石有着很高的比表面积,它们具有更强的吸附能力,低结晶度和高比表面积(170 m²/g)的羟基磷灰石粉末在制备后能够定量去除Pb、Zn、Be、U、Bi、V、Al、Cu和Ga等多个离子,而结晶度更高(65-95%)和比表面积在5-30m²/g之间的粉末只能去除少数元素(Pb、Bi、Ga)。活性炭也是一种常用于过滤重金属离子的材料,对Pb2+吸附率为30 mg/g,Zn2+的离子去除能力在9.9-18 mg/g。而纳米羟基磷灰石在吸附 Zn2+的效率是活性炭的420%,吸附Pb2+吸附方面则超过了700%。

有机污染物可能来自皮革、制药、纺织、油漆和造纸工业排放的废水。大量有机污染物会消耗水中溶解氧,产生甲烷气等还原性气体,使水中动植物大量死亡,水体也因此变黑变浑变臭。而羟基磷灰石也可以较好地吸附这类有机污染物,部分的吸附数据见下表,或者参考:10.1016/j.chemosphere.2024.142236。

综合来看,羟基磷灰石,尤其是纳米级材料,具备吸附能力强、表面改性容易,并且经济成本较低等优点,在吸附整治污水领域具有一定的应用前景。究竟有哪些因素决定了一个材质是否能够有较好的吸附能力,以及我们如何去改造或者制备这类材料呢?


比表面积 - 吸附能力的核心

上文中的吸附能力本身虽然来自于钙离子和磷酸根,但一个40μm的羟基磷灰石微球毕竟体积有限,有限的体积要做到更高的吸附能力,其核心因素就在于更加广阔的与目标物接触面积 - 即比表面积。

比表面积(Specific Surface Area,SSA)是指单位质量物料所具有的总面积。单位是m2/g。通常固体材料才有比表面积,例如粉末、纤维、颗粒、片状及块状材料。比表面积还有另一种定义:面积/体积。

在多孔固体中,由于外表面积相对内表面积而言很小,基本可以忽略不计,因此比表面积通常指“内表面积”。不同固体物质比表面积差别很大,通常用作吸附剂、脱水剂和催化剂的固体物质比表面积较大。比如氧化铝比表面通常在100-400m2/g,分子筛300-2000m2/g,活性碳可达1000m2/g以上。而多孔的羟基磷灰石 SSA 大约在 30-40m2/g,实心的羟基磷灰石 SSA甚至可以低于1m2/g

测试 SSA 的方法通常是气体吸附法。根据气体在固体表面的吸附特性,在一定压力下,被测样品颗粒(吸附剂)表面在超低温下对气体分子(吸附质)具有可逆物理吸附作用,并对应一定压力存在确定的平衡吸附量。通过测定出该平衡吸附量,利用理论模型来等效求出样品的比表面积。想了解更多计算 SSA 的读者,可以参考 10.1021/ja071174k 或者:http://www.cailiaoniu.com/30113.html,我们这里不过多赘述。

由此可知,高 SSA 类材质,其吸附能力往往都很突出(例如富勒烯、活性炭),而高 SSA 的物质必须是有足够多的孔洞,其围观下如同海绵,有非常多的细小微孔,例如上图中是多孔中空的羟基磷灰石微球(详情点击:贝融羟基磷灰石型号一览),就属于比表面积较高,吸附能力也较强的。

那么这类材质用于医美注射,会发生什么?我们曾经有过分析(点击阅读:羟基磷灰石与骨生成),多孔材质会促进骨的生长,在国外的一些临床应用中,往往会使用贝壳或者珊瑚来源的羟基磷灰石注射至面部,这类多孔材料搭配胶原蛋白和 PRP,有很好的成骨性,因而大幅度延长产品的维持时间(下图红箭头)。因此,面部软组织的填充(例如颞部、中面部、鼻唇沟),不建议选用多孔羟基磷灰石微球,而更应该选择更加实心的微球。
微孔更多、比表面积更多的微球的一个特性是可以用于药物缓释。比如搭配一些营养类物质(重组胶原、动能素类),可以通过调整 pH 来吸附目标蛋白,而当饱和吸附了这些营养蛋白的微球进入皮肤,进入降解的循环,随着微球溶解,吸附的蛋白便释放出来,既可以解决重组胶原过短的半衰期,也可以更加精准地定位释放。需要注意的是,一旦搭载的蛋白有较强的免疫原性,可能会出现漫长且迟发和反复的免疫反应。
未来我们会继续分享羟基磷灰石及其在医美、环保、涂料等多个领域的创新应用,以及这类微球作为注射材料的新思考、新灵感。请持续关注Herostem Lab汇融实验室及其下属单位BETAGENE Genetic贝融生物的研发进展。


HEROSTEMLAB 汇融实验室

作为国内领先的蛋白质工程领域研发与生产型企业,以及政府授牌的城市人类间充质干细胞库,上海汇融细胞科技有限公司(HEROSTEM® LAB,汇融实验室®)致力于为社会提供卓越的细胞药物与重组蛋白生物试剂。HEROSTEM®LAB汇融实验室®建立了严格的产品质控体系以及完善的服务流程,并通过ISO9001、ISO13485认证,按照GMP标准运行,以确保为我们的顾客提供优质、稳定、可靠的产品与技术开发服务。
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HEROSTEM® Inc., an innovation biotechnology company, is based in Shanghai, China. The laboratory initiated stem cell study and clinical applications back in 2007. Combining stem cell and genetic engineering platforms, HEROSTEM continues to deepen its research and development in the field of bio-based aesthetics, and has launched more than 20 regenerative aesthetic SKUs.

BETAGENE® Genetic, a Shanghai-based innovation-driven company and a subsidary of HEROSTEM®, is a global reagent and hydroxyapatite supllier. We provide and market a wide range of GMP recombinant proteins, enzymes, customized proteins and hydroxyapatite sphere through genetic engineering and biosynthesis . The company has developed several recombinant expression systems including bacterial, yeast, insects and mammalian.

We specialize in making animal-free GMP products for cell and gene therapy, antibody, vaccine, IVD, cosmetics and tissue engineering industries. Specially designed and customized proteins are available upon requests.



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