文献阅读是大家提升科研素养的必经之路,平日里我也经常看一些文献。当我看到很接地气的SCI文章时,非常想把内容分享给大家,比如这一篇。
背景:尽管溶血对临床生化测试的影响已经广泛研究,但实验室工作人员仍然缺乏一种实用的指南,帮助他们快速确定溶血样本是否可接受以及如何解释测试结果。本文介绍了一种参考图表,作为处理溶血样本的便捷工具。
方法:制备0.1%、0.3%、1%、3%和10%溶血的血清样本,分别进行了35项湿生化测试和22项干生化测试。通过将无溶血样本的原始测试结果与每种溶血条件下的测试结果相减,得出了溶血条件对生化测试结果的影响。使用这些净结果进行分析,并制备了参考图表。
结果:该参考图表展示了溶血干扰的分析结果和相关的统计分析。图表还显示了各个溶血条件下血清样本的颜色外观,供临床工作人员判断溶血样本是否可接受。
结论:在临床实验室中,准备这样的参考图表对于处理溶血样本进行生化测试非常有用。
样本制作方法:将1.0mL EDTA抗凝的全血样品离心以保留红细胞(RBCs),然后用盐水洗涤三次,直到盐水变得澄清。向红细胞中加入去离子水,使体积达到1.0毫升。由于这不足以完全分解红细胞,然后用微尖端以30%的振幅对样品进行三次超声处理,每次5秒,间隔5秒。在显微镜下证实完全溶血。在初步研究中,将相同的超声处理条件应用于血清样品,以确保超声处理对临床生物化学分析物没有影响,因为超声处理可能使生物化学酶变性,产生假阴性结果。接下来,将0.1、0.03和0.01 mL上述制备的溶血样品分别加入0.9、0.97和0.99 mL血清中,以获得10%、3%和1%的溶血样品。此外,从3%和1%溶血样品制备0.3%和0.1%溶血血清样品。
结果:
图1
图1A:展示了不同溶血程度下的血清样本的颜色变化。颜色从浅红色逐渐变为深红色,用于帮助实验室工作人员通过目测估算溶血程度。不同溶血水平下的血红蛋白浓度(mg/L)和溶血指数也列出,显示出非常高的相关性(R² = 0.997 和 0.999)。图1B:展示了血红蛋白浓度与溶血指数之间的线性回归关系。该图说明了随着溶血程度的增加,溶血指数和血红蛋白浓度之间存在高度相关性,可以用于校正溶血对某些生化指标的干扰。
图2
图2:展示了不同溶血条件下的湿生化测试结果,包括白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、淀粉酶(AMY)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酐(CREA)、葡萄糖(GLU)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆红素(TBIL)和总蛋白(TP)。不同个体的结果用折线图展示,显示了溶血对这些指标的影响。
图3
图3:展示了不同溶血条件下的干生化测试结果。与图2类似,也展示了白蛋白、ALT、AMY、AST、CK、CREA、GLU、LDH、TBIL和TP的变化趋势。
图4
图4:总结了不同溶血水平下各个生化指标的净变化值,提供了实验室可以使用的参考图表。通过表格中的数据,实验室工作人员可以根据溶血程度对测试结果进行校正。表格还包括统计分析结果,如单因素方差分析(ANOVA)和线性回归结果,显示了溶血对某些指标的显著影响。
4. 讨论
本研究开发了一张参考图表,用于定量分析溶血对常规临床生化检测的影响。通过该图表,临床实验室人员可以决定是否接受溶血的血清样本,并更准确地解释检测结果,去除溶血的干扰部分。
与先前报告的一致性:研究结果与先前的研究基本一致,尤其是在溶血对关键分析物(如LDH、钾、CK、CK-MB)影响的方面。这些分析物在诊断心脏事件等疾病时非常重要。研究发现,溶血对这些参数有显著影响,这与早期研究表明的趋势相符。然而,许多早期研究使用的是冷冻-解冻或机械创伤的方法,而没有充分评估细胞裂解的完成情况,这可能导致结果不准确。
方法学改进:与之前的工作不同,本研究采用超声法裂解红细胞,并通过显微镜确认裂解完全。这种方法提供了更精确的分析结果,避免了对分析物水平的低估。此外,图表还直观地显示了溶血样本的颜色变化,为实验室技术人员在分析前判断样本质量提供了有用的工具。在临床紧急情况下无法重新采集样本时,提供的校正公式尤其有用。
溶血的影响:溶血通过释放裂解的红细胞内含物,对生化检测结果产生“干扰”。研究表明,溶血的影响是累加的,可以通过提供的校正公式进行数学调整,从而计算出真实的分析物水平。例如,ALT的校正公式可以根据溶血指数调整检测结果,从而提高溶血样本的检测准确性。
局限性:该研究中的参考图表基于特定人群的样本开发,未考虑高脂血症或胆红素含量高的样本。这些因素可能会影响图表在更广泛临床场景中的准确性。未来的研究应探讨脂质和胆红素的干扰,以扩展图表的适用性。
结论:本研究得出的参考图表是临床实验室预分析筛查的有价值工具,特别适用于难以重新采集血样的情况下。各实验室可以根据自身的生化分析系统调整参考图表,以提高溶血样本检测结果的准确性。
有些值,文中给出了校正公式,大家可以试用一下。有些值,文中没有给出校正公式,说明溶血影响很大,或者是溶血的干扰过于复杂,无法用简单的公式进行校正。
溶血是一个非常常见的问题,大都数时,咱们就拒收,让临床重采。但有时会发现,多次采集,均溶血,而临床还急切的需要结果时,该怎么进行处理呢?本文给出了一个比较好的办法。另外文章的作者也是有心人,按理说这个实验很简单,这个设备我们我们医院也有,但我就没有想过写一篇这样的文章。所以,我们大家还有很大的进步空间。大家一起加油!
如果想看原文,大家可以去pubmed上搜索
A Reference chart for clinical biochemical tests of hemolyzed serum samples
Jun Ni 1, Wenbo Zhu 1, Yanyang Wang 2, Xuefei Wei 2, Jingjing Li 3, Lu Peng 4, Kui Zhang 1, Bing Bai 1 2 3
PMID: 32881061
PMCID: PMC7843283
DOI: 10.1002/jcla.23561