引言：脉络膜黑色素瘤（UM）是最常见的眼部原发性恶性肿瘤，约有50%的患者会发展为肝转移。与皮肤黑色素瘤不同，免疫检查点抑制剂（ICIs）对治疗UM转移的效果有限，约一半的转移性UM患者在两年内病亡。澳大利亚Harry Perkins医学研究所Jonas Nilsson等通过识别肿瘤反应性淋巴细胞（TRLs），利用患者来源的异种移植（PDX）和单细胞测序技术，改善UM的免疫疗法效果。
主要发现：
1. 肿瘤反应性淋巴细胞（TRLs）的识别： 通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）和T细胞受体测序（TCR-seq），研究发现UM肝转移中存在三种不同亚型的肿瘤反应性淋巴细胞：活化的、耗竭的和细胞毒效应细胞。这些TRLs存在于肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）中，为免疫疗法提供了潜在的靶点。
2. UM转移的PDX模型： 研究人员通过将UM转移的活检样本移植到免疫缺陷小鼠中，建立了PDX模型。这些模型用于生成肿瘤球体培养物，与自体或MART1特异性的TILs进行共培养。研究表明，TILs在某些PDX模型中可以消灭自体肿瘤，显示了其治疗潜力。
3. TRLs的功能验证： 功能测试表明TRLs能够识别并杀死肿瘤细胞。具体而言，TRLs在体外扩展后，在3D肿瘤球体共培养实验中显示出肿瘤杀伤活性。与散装TILs相比，MART1特异性TILs表现出更强的活化和脱颗粒反应，支持其在靶向UM细胞中的作用。
4. UM转移的单细胞图谱： 本研究创建了迄今为止最大的转移性UM单细胞图谱，揭示了T细胞群体的异质性。TRLs主要来源于耗竭和后期活化的T细胞簇，其中一些被识别为NK样细胞毒性簇。研究表明，耗竭的TRLs仍然可以表现出强大的抗肿瘤活性，这一发现挑战了传统认为耗竭T细胞无功能的观点。
5. 免疫疗法的潜力： 研究结果为如何利用TRLs进行过继细胞治疗（ACT）提供了见解。研究表明，体外扩展肿瘤特异性TRLs，特别是靶向已知抗原如MART1的T细胞，可能会提高ACT的疗效。
结论：本研究提供了UM转移中TRLs的详细图谱，识别了三种可能用于免疫治疗的关键亚型。PDX模型和肿瘤球体培养物的创建使得这些TRLs的功能验证成为可能，显示了其消灭肿瘤的潜力。这些发现为UM患者开发更有效的细胞疗法奠定了基础，特别是通过扩展肿瘤特异性TILs。
影响： 在UM肝转移中识别出不同的TRL亚型为改善这种难以治疗的癌症的免疫疗法开辟了新途径。通过重点扩展和靶向特定的TRLs，如MART1特异性T细胞，过继细胞疗法可能成为UM患者的可行治疗选择。此外，研究创建的转移性UM单细胞图谱将成为进一步研究UM中免疫反应的重要资源。
参考文献
Joakim W Karlsson et al. Patient derived xenografts and single cell sequencing identifies three subtypes of tumor reactive lymphocytes in uveal melanoma metastases. eLife. 2023
