红细胞渗透脆性实验的临床意义

学术 2024-10-19 17:32 河南

原理

红细胞渗透脆性试验(erythrocyte osmotic fragility test)是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液抵抗力的一种半定量试验。在低渗盐溶液中，由于水分渗入细胞内，红细胞会膨胀甚至破裂、溶血。因此将红细胞加到不同浓度的低渗盐溶液中，观察发生溶血的情况，可判断红细胞对低渗盐溶液的抵抗能力。

红细胞开始出现溶血的低渗盐溶液浓度为开始溶血浓度，红细胞完全溶血的盐溶液浓度为完全溶血浓度。当某些原因导致红细胞对低渗盐溶液抵抗能力降低时，红细胞容易破碎，发生溶血，称为红细胞渗透脆性增加；反之，称为红细胞渗透脆性降低。

检测方法

1.试剂与器材

1.1 器材：分析天平、注射器、针头、无菌小试管等。

1.2 试剂：1% NaCl溶液：用分析天平称取分析纯 NaC1 1.000g，加少量蒸馏水溶解，于100ml容量瓶中用蒸馏水定容，置于玻璃瓶中灭菌后使用。

2. 操作

2.1 取12支无菌小试管编号，按表配制不同浓度的 NaCI 溶液。

2.2 用肝素湿润的注射器抽取待检者血液 1ml，向各管中加入1滴(中度以上贫血的标本加2滴)全血，轻轻摇，室温静置2小时后观察结果。

3.结果判断

从1号管开始观察溶血情况。

不溶血：上清液透明无红色;

开始溶血：上清液刚呈浅红色，管底有较多未溶的红细胞；

完全溶血：溶液呈透明红色，管底无红细胞。

参考区间

开始溶血 NaCl浓度：3.8~4.6g/L;

完全溶血 NaCl浓度：2.8~3.2g/L

注意事项

1.NaCl必须干燥，可将分析纯氯化钠于100℃下烘干，置于干燥器中完全冷却后再准确称量使用。

2.所用器具应干燥清洁，避免出现人为溶血。向试管内滴加血液时须将血液直接注入试剂中，不可沿管壁注入，混匀时动作须轻柔。

3.观察溶血情况时以白色背景为宜。

4.结果不易判断时，可低速短时离心后观察

5.每次试验应以相同实验条件做正常对照。被检者与正常对照开始溶血管的 NaCI浓度相差0.4g/L即有诊断价值。

6.黄疸标本结果不易观察，重度贫血患者红细胞过少，可离心弃血浆后用生理盐水洗涤，并配成50%的红细胞悬液进行试验。

7.避免使用 EDTA 盐、枸橼酸盐和草酸盐抗凝，以免增加离子浓度，改变渗透压，也可选用洗涤红细胞进行检测。

8.红细胞膜异常改变较轻微的病例，应采用更敏感的试验，如红细胞孵育渗透脆性试验。将红细胞先置于37℃孵育 24 小时，使红细胞葡萄糖消耗，ATP 储备减少，红细胞膜对阳离子的主动转运受阻，阳离子在细胞内蓄积，细胞膨胀，脆性增加后，再进行相应的渗透脆性试验(以50%溶血率的盐水浓度表示)。

临床意义

1. 本试验简便实用，但敏感性较差，对溶血性贫血的病因诊断有参考价值，但需结合其他检验结果进行综合分析。

2. 增高主要见于遗传性球形红细胞增多症、遗传性椭圆形红细胞增多症、部分自身免疫性溶血性贫血、遗传性口型红细胞增多症及2型糖尿病等。

3. 减低主要见于珠蛋白生成障碍性贫血，血红蛋白 C、D、E病，低色素性贫血，以及阻塞性黄疸、脾切除术后、肝炎、肝硬化、肝癌等。某些中药(如当归)、磁场、紫外线亦可降低红细胞渗透脆性。

4. 此法也可用于丙酮酸激酶缺陷症等红细胞酶缺陷性溶血的诊断。

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