知母新增的新芒果苷是什么成分?采收、炮制、鲜切、储存等对其有什么影响?成分如何转化?本文将进行探讨
1、知母的指标控制成分
《中国药典》2020年版规定:
含芒果苷(C19H18O11)不得少于0.50%,含知母皂苷BII(C45H76O19)不得少于3.0%。因知母皂苷BII较易合格,这里不做重点讨论。
《中国药典》2025年版拟修订为:
本品按干燥品计算,含新芒果苷(C25H28O16)和芒果苷(C19H18O11)的总量不得少于 1.20%。含量测定前处理提取溶剂也发生了变化,由丙酮改为了50%甲醇。
芒果苷又名莞知母宁或芒果素,是一种四羟基吡酮的碳酮苷,属双苯吡酮类黄酮类化合物。
性质:熔点267~272℃(分解)。略溶于甲醇、乙醇、水、可溶于热稀甲醇、热稀乙醇,不溶于非极性溶剂。
新芒果苷是一种天然产物,主要存在于芒果的果实中。属双苯吡酮类黄酮类化合物。它是一种白色结晶性固体,微溶于水。
新芒果苷的制取方法主要是通过从芒果果实中提取,然后进行纯化和结晶得到。提取方法可以使用水提、盐酸提等不同的方法。
新芒果苷是在芒果苷 7 位羟基上连一个葡萄糖,在一定条件下新芒果苷结构中的糖苷基可发生断裂,转化成芒果苷。有文献报道,炒制和盐炙知母会导致其新芒果苷含量下降,芒果苷含量上升,分析原因可能是新芒果苷上的糖苷基对热不稳定,在炮制过程中糖苷键易断裂而转化为芒果苷。
在 2017 年国家药品计划抽验项目中药饮片专题中,对 188 批知母饮片新芒果苷、芒果苷的含量与水分进行相关性分析,结果表明饮片水分越高,新芒果苷含量越低,芒果苷含量越高;将3批毛知母用水浸泡3天后测定其新芒果苷和芒果苷含量,3 批毛知母新芒果苷几乎全部转化为芒果苷,表明可能知母含水率越高,新芒果苷越容易转化为芒果苷[4]。
有药理研究表明,知母总酚中降血糖的活性成分主要为芒果苷,而新芒果苷无该功效。也可以这么说,新芒果苷是芒果苷的前体,本身活性低,但是可以转化为药理活性较高的芒果苷。所以本次国家标准的修订,检测新芒果苷与芒果苷含量之和更为合理。
7位羟基上葡萄糖脱去,转化为芒果苷
中国药典规定为春、秋二季采挖,那么采收期又会如何影响各成分的变化呢?
知母生长过程中,新芒果苷与芒果苷类成分的动态变化规律,以河北道地产区“西陵知母”为例:可以看出新芒果苷与芒果苷的含量在整个年度中的变化波动较大,且两者的变化趋势基本相反。新芒果苷在5月份和10月份处于两个最高峰,其中秋季含量高于春季含量,雨季过程中含量整体都比较低而芒果苷含量却恰恰相反,6月份含量处于最高峰,整个雨季过程中变化比较平稳,波动不大,而春季和秋季含量量较低,秋季略低于春季[1]。
知母生长过程中,知母皂苷BII的动态变化规律,以安徽亳州栽培知母为例:从3月份到11月份亳州知母中知母皂苷BⅡ含量呈动态变化,在一个生长季中分别出现2个高峰。知母皂苷BⅡ含量高峰出现在3月份和11月份,说明不同采收时间对亳州知母药材质量有较大的影响[6]。
综合考虑,由于5月份为知母地上部分迅速生长期,9月份以后是知母地下增重时间,因此,5月份到10月份不适宜知母的采收,11月份知母中知母皂苷BⅡ和芒果苷类含量依然处于较高的水平,秋季采收优于春季。
4、知母的生长年限对芒果苷含量的影响
市场询问中得知,现在知母的两大产地,安徽亳州与河北地区的种植年限不完全相同。亳州地区一般为移栽后一年多进行采挖,河北安国地区一般为移栽后2-3年进行采挖。研究发现,二年生知母新芒果苷和芒果苷含量总和与三到四年生知母差异并不大。
5、去皮的必要性,知母肉与毛知母
目前药典收载的知母产地加工方法为:采挖新鲜知母的根茎,除去须根及泥沙,晒干,习称“毛知母”;或除去外皮,晒干,习称“知母肉”。新修订标准来源中明确列出“知母肉”并列出知母肉的性状,那么去皮与否对含量有什么有什么影响呢?
知母皮中的新芒果苷与芒果苷含量之和略低于知母肉,单从该成分来说,去皮的影响不大。但是,知母肉饮片中另一个重要的药理活性物质知母皂苷BⅡ含量明显高于毛知母饮片,表明知母肉的存在具有一定的合理性[5]。
6、鲜切片与润切片
7.知母须根的含量
笔者多次验收时发现:知母大货中,总是或多或少的有些须根,供应商说这很难去除,不知道是有意为之还是无心之举,查阅资料发现,知母须根中新芒果苷与芒果苷总含量也能达到新标准的要求,所以,掺入须根不会导致知母大货的整体含量不合格。
下图:左边为大货中挑出来的根须
8.炮制的影响
炒制和盐炙知母会导致其新芒果苷含量下降,芒果苷含量上升,分析原因可能是新芒果苷上的糖苷基对热不稳定,在炮制过程中糖苷键易断裂而转化为芒果苷知母经过盐炙之后,整体上新芒果苷与芒果苷总含量变化不明显,只要不过度炮制,指标成分都能符合药典要求。
另外发现,盐炙后,知母皂苷BⅡ含量降低,知母皂苷 AⅢ含量升高;由此推测,知母炮制后部分知母皂苷BⅡ可能会转化成知母皂苷AⅢ。
9.煎煮过程的转化
实验发现,样品煎煮前和煎煮后新芒果苷和芒果苷含量有显著变化,由图可见,煎煮后知母中新芒果苷含量降低,芒果苷含量升高。
10.硫磺熏制的影响
调查发现,部分加工户为了防腐和美观,常用硫磺熏蒸知母药材,结果显示知母中二氧化硫残留量与芒果苷含量呈极显著正相关,与新芒果苷含量呈显著负相关,与知母皂苷BⅡ含量呈极显著负相关。
表明熏硫对知母中化学成分的含量有影响。即熏硫会导致新芒果苷向芒果苷转化,熏硫前后知母皂苷BⅡ含量明显下降,甚至会导致知母皂苷BⅡ含量不合格,知母皂苷BⅡ为知母中重要的具药理活性成分,可见熏硫会对知母的质量产生较重要影响[5]。
11、储藏期的影响
知母饮片易吸湿,应存放在干燥处,水分应控制在12%以内。将知母饮片常温储存两个月后重新测定其新芒果苷和芒果苷含量,发现含水率越高,其新芒果苷含量降低越多,芒果苷含量升高越多。知母在高含水率的情况下,新芒果苷更容易转化为芒果苷。建议知母饮片在生产后2年内使用完。
参考文献
[1]杨东升.“西陵知母”有效成分动态积累研究及知母多糖类成分研究[D].北京:北京中医药大学,2009.
[2]赵小勤,黄晓婧,等.不同部位和不同产地加工方法的知母质量评价研究[J].中草药,2021,52(22).
[3] 郭晓哗.采收加工方法对知母成分含量影响研究及北京市医疗机构知母饮片质量调查[D].北京:北京中医药大学,2010.
[4]赵小勤,许莉,等.水煎煮条件下知母新芒果苷和芒果苷成分转化关系研究[J].中国药物评价,2022,39(4).
[5]赵小勤.知母饮片的质量分析与研究[J].中国药事,2018,32(10):1349
[6]俞年军,马义雯,等.亳州栽培知母最佳采收期研究[J].安徽中医药大学学报,2014,33(2)
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