大家好！
今天的曦曦说，我们来聊聊「圆环病毒」的防控吧~
我很荣幸邀请到了华南农业大学的宋长绪教授 —— 宋老师是国家生猪种业工程技术研究中心的猪病功能实验室主任，长期从事猪病的临床诊断和技术服务工作，有着非常丰富的经验，过去这20多年，宋老师一直在深入研究圆环病毒对养猪行业产生的影响。今天，我们来一起聊聊圆环病毒中和抗体的研究进展和应用方向，包括大家最关心的这几个问题 ——
一起听听吧~
您的故事
宋老师: 我当年选择专业时，畜牧兽医并不是许多学生愿意报考的冷门专业，但进入学校后我发现，冷门专业其实并不代表专业前景不行。一路读到了博士毕业后，我选择到了条件相对没那么好的研究所进行临床应用研究，这个决定让我在临床方面有了很深入的了解。后来，我又回到大学，继续开展临床、科研工作。
回顾这些选择，我觉得非常幸运 —— 如果不是在科研条件较差的研究所工作，在临床方面的研究就不会这么深入；假如不回到大学，我对科研的理解深度就不够。畜牧兽医专业的前景广阔，可以有所作为！
目前国内养猪业对圆环病毒的认识如何？
宋老师: 我从1998年便开始关注圆环病毒了，当时进行了流行病学调查和检测引物合成等准备工作。后来，我去美国做了三年多的博士后研究，2002年回国后，便正式开展起来圆环病毒的研究工作，到今天已有22年了。
当时在国内，我们实验室算是起步比较早的研究者，我也开始在行业内分享圆环病毒的重要性 —— 国内对圆环病毒的认知相对较为缓慢，很多人当年甚至并不觉得这是一个对产业有影响的疾病，没有意识到它的危害；而基于我们在临床上做的大量工作，我们发现，圆环病毒的危害是全方位的！它对猪只的各个系统、对生产的每个环节都有显著的影响。
令人欣慰的是，通过我们以及整个行业的努力科普，目前大家对圆环病毒的认知已经得到了明显的提升，圆环疫苗的普及也使得圆环病毒得到了挺好的防控。
圆环病毒的病原学、流行病学和防控现状是怎么样的呢？
圆环病毒2型遗传进化树（图片源自Marina Sibila et al., 2021）
猪血浆蛋白粉应用的警示
16年前，在波兰的2007 Emerging swine Disease会议上，我曾做过一个关于小鼠食用猪血浆蛋白粉后、血液中检测到圆环病毒和圆环抗体的Poster报告。这在当时引起了许多同行的讨论和反思。
当非洲猪瘟爆发之后，大家开始比较警觉，大幅度减少了血浆蛋白粉在猪料中的使用。现在，猪血浆蛋白粉大多被用于禽料或水产料中，对水产而言，而如果鱼塘河流被病毒污染，可能仍会给当地的养猪场带来潜在风险，需要大家关注。
猪血浆蛋白粉的生产工艺流程 + 生物安全步骤：以猪血为原料，通过喷雾干燥工艺制作。含有优质蛋白质，适口性好，消化率高，并含有天然免疫球蛋白。（图片源自Elena Blázquez et al., 2020）
拓展阅读：关于血浆蛋白的生物安全，另一个角度：
「中和抗体」是什么？
宋老师: 几乎所有的病毒在感染动物之后，机体都会产生很多种抗体 （一个「抗原表位」就能产生一种抗体）；但要注意，大部分抗体是不能阻止病毒感染的，而「中和抗体」则是具有特异性的抗病毒抗体，它与病毒结合之后，能让病毒感染能力下降或者失活，从而阻止了病毒在宿主细胞内的复制和病毒感染机体的过程。
再来一个PCV-2的感染过程。PCV2的基因组共有11个开放阅读框架（Open Reading Frames, ORFs），其中ORF2编码着病毒唯一的结构蛋白——核衣壳蛋白（Cap），这个蛋白由234个氨基酸组成，分子量为28kDa，可自我组装形成病毒样颗粒。Cap蛋白是PCV2的主要免疫原性蛋白，能够诱导产生特异的PCV2中和抗体，因此，ORF2基因是设计PCV2新型疫苗的首选目标基因 （图片引自Zhai et al., 2014)
中和抗体试验（Neutralization test) 的方法（图片来自硕腾）
可以分享您最近做的圆环疫苗中和抗体评定工作吗？
宋老师: 最近我们用检测中和抗体的方法，评估了几个不同的「圆环病毒疫苗」。
我们很幸运地找到了一个健康度特别高的猪场，在产房免疫大约110-130天后，待所有抗体消退后（检测了PCV的抗原和抗体，均为阴性，从而避免母源抗体对疫苗免疫产生的干扰），用不同的圆环病毒疫苗进行了接种，每组10头猪。接着，在免疫当天和免疫后的2、4、6、8、10周进行采血，检测中和抗体水平。
瑞圆舒组(ZO)的PCV-2中和抗体产生快，第二周基本上都超过了64（数据来自宋老师)
第4周时，瑞圆舒组(ZO)的PCV-2中和抗体效价仍然优于其他疫苗，达到1024（数据来自宋老师)
而最终，还是要看疫苗在猪群中的实地评估 —— 除了实验室评估（比如抗原含量测定、中和抗体测定之外)，猪场生产性能的评估也至关重要，包括料肉比、健康状态和繁殖状况等。
尽管用中和抗体方法来评价圆环病毒疫苗效果是科学准确的，但由于其难度较大，我认为大家可以每1-2年进行一次评估，对疫苗的整体效果有一个清晰的认识就可以。频繁进行评估并不必要，毕竟工作量太大，也耗时耗力成本高。
瑞圆舒可以有效降低病毒血症比例 （图片来自硕腾）
拓展阅读
未来圆环病毒的防控方向
宋老师: 针对PCV-2，我认为防控难度不是很大，疫苗效果显著，可以有效保证猪群的健康。放眼未来，通过生物安全、检测淘汰和疫苗免疫， PCV-2可以实现相对净化，但我并不建议相对净化了就不免疫了，要实现绝对净化仍然很难。
圆环病毒3型遗传进化树（图片源自Viviane Saporiti et al., 2020)
通过对CAP蛋白基因序列的比对，我们发现PCV-2和PCV-3之间的同源性较低，因此二型圆环病毒疫苗的交叉保护效果就很差。从行业的现状就可以得知，虽然目前大部分养猪场都在免疫圆环2型疫苗，但PCV-3的感染率却不断上升，这说明交叉保护效果不太理想，不到30%，未来可能需要开发PCV-3的疫苗。
PCV-3到底对生产的危害有多大？有些猪场的感染率达50%以上，但是从生产成绩上看并没有影响，这也是大家比较困扰的地方。但值得注意的是，当年PCV-2刚出现时，一些生产条件良好的猪场似乎也未观察到其对生产的影响，这与现在的PCV-3现状很相似。我相信，随着PCV-3感染率的上升，对猪群的健康会是一种侵蚀，因此需要引起大家的重视。未来如果PCV-3给生猪生产带来巨大影响，疫苗免疫仍然将是防控的重要手段。
最喜欢的资料与方法
专业书籍：1）多读第一手的原始文献和生产数据。2）注重实践！很多东西需要在实践中去观察和验证。
如果遇见年轻时的自己，你会对TA说什么呢？
宋老师: 年轻时我不爱听老师的话~ 现在觉得虽然自己想去闯一闯没问题，但还是要学会多多吸取老师们和他人的建议。
【硕腾特约采访】
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