进行性核上性麻痹（PSP）和皮质基底节综合征（CBS）是两种非典型帕金森综合征，表现出显著的表型异质性以及尤其在CBS中的病理异质性，目前尚无有效的疾病修饰疗法。老年人群中α-突触核蛋白（αSyn）错误折叠的沉积非常常见。在一个大型尸检队列中，超过50 %的阿尔兹海默病（AD）、10%的皮质基底节变性（CBD）、15%的伴有TDP-43蛋白病的额颞叶变性（FTLD-TDP-43）和22%的PSP病例同时存在αSyn病理，这些都可能导致其临床表现为 CBS。在病理确诊的PSP中，共病（特别是αSyn）的频率存在争议，估计为8 %-20%。
在迈向精准医学的过程中，识别神经退行性疾病中的分子靶点，从而实现个性化治疗，尤其是疾病修饰治疗是一个关键目标。在CBS和PSP中，病理异质性以及与其他神经退行性疾病（如阿尔茨海默病AD或帕金森病PD）的临床重叠阻碍了这一方向的进展。尽管PSP和CBS的病理异质性仍需进一步研究，新的生物标志物开发已显示出潜力，带来新的治疗前景。种子扩增试验（SAA）可有助于检测α-突触核蛋白（αSyn）共病，这将可能有助于患者分层，进而影响未来疾病修正治疗策略的开发。
本研究通过αSyn SAA检测了68例CBS或PSP患者的脑脊液αSyn播种活性，评估PSP和CBS中可能存在的αSyn共病。本研究假设，在PSP和CBS中能够检测到αSyn-SAA阳性，并且它与阿尔茨海默病生物标志物阳性、β-淀粉样蛋白42（Aβ42）水平、神经丝蛋白轻链（NfL）水平反映的神经退行性病变，以及与突触核蛋白病相关症状存在关联。
招募：
本研究获得了多伦多健康网络研究伦理委员会的批准，纳入了在多伦多西部医院记忆或运动障碍诊所临床诊断为PSP或CBS的患者。这些患者签署了知情同意书并接受了腰椎穿刺。PSP组的患者符合运动障碍协会对PSP-Richardson综合征的修订标准。大多数患者在2017年前首次就诊，并根据国家神经疾病与卒中研究所–进行性核上性麻痹协会（SPSP）临床试验的修订标准，被诊断为很可能或可能得PSP，未符合该标准的患者最终被诊断为PSP-Richardson综合征，或尸检结果与PSP病理相符。Richardson综合征的临床诊断对PSP病理的特异性几乎为100%。CBS队列的参与者符合2013年标准中可能或很可能的CBD、CBS亚型。所有患者均接受阿尔茨海默病的检测，并且大多数患者进行了APOE ε4检测。
临床数据：
61名患者在腰椎穿刺后6个月内完成了蒙特利尔认知评估 (MoCA)，并使用梅奥诊所开发的在线工具进行z评分。随访期间定期进行AD 研究中心的神经检查，并收集帕金森相关症状的进程、左旋多巴的摄入和反应、快速眼动睡眠行为障碍病史以及视幻觉等数据。
检 测：
脑脊液的收集、预处理和分析在既往研究中已详细描述。AD生物标志物阳性（AD+）的截止值为ptau181≥68 pg/mL、淀粉样蛋白tau指数（ATI）≤0.8（ATI定义为Aβ42/ [240 + 1.18×t-tau]）。αSyn-SAA反应按照先前描述的方法进行，若4个复孔中3个以上的荧光信号超过阈值，则样本被视为阳性（αSyn-SAA+），否则视为阴性（αSyn-SAA-）。
统计分析：
使用R (4.2.2) 进行分析。应用标准程序来选择适当的检验和模型：使用Shapiro-Wilk检验和直方图评估正态性，使用Levene检验评估同方差，使用F方差检验、Akaike信息准则进行模型选择等。对于表1中报告的描述性统计数据，对数值变量使用了 Student t检验和 Wilcoxon 符号检验，对生物标志物水平使用了控制年龄的协方差分析。使用双侧χ2检验或 Fisher 精确检验（至少1个单元格的期望值 <5）分析分类变量之间的关联。计算优势比 (OR)、φ统计量。使用多变量回归模型分析αSyn-SAA 状态对生物标志物（Aβ42 和 NfL）的影响。使用逻辑回归模型研究与αSyn-SAA+概率增加相关的变量。必要时应用Bonferroni 校正进行多重比较校正。
共有40例CBS 患者（19名女性，48%）和28例PSP患者（13名女性，46%），其中1例CBS患者因最终被确诊为突触核蛋白病（去世后确诊，但检测未能捕捉到）而被排除（本研究从此仅涉及纳入的67例患者）。表1显示了本研究的人口统计学特征。
表1. 本研究的人口统计学特征
αSyn-SAA阳性与人口统计学特征：
在39例CBS患者中，14例（9名女性）αSyn-SAA阳性；在28例PSP患者中，8例（3名女性）αSyn-SAA阳性。PSP患者的年龄（72.5±8.7岁）明显大于CBS患者（65.9±8.6岁）。诊断和αSyn-SAA状态之间对年龄没有显著交互作用。大约一半的αSyn-SAA阳性和阴性患者（αSyn-SAA阳性10/22，αSyn-SAA阴性22/45）发病时的症状包括运动症状。没有发现αSyn-SAA状态与性别（p = 0.44）或APOE基因型（p = 0.52）之间存在关联。
αSyn-SAA阳性与AD的关联：
正如预期，CBS患者中AD阳性（AD+）比例较PSP患者更高（CBS为12/39，PSP为3/28，p = 0.05）。47%的AD+患者和29%的AD-患者为αSyn-SAA阳性，但AD+与αSyn-SAA阳性的关联未达显著性（p = 0.22）。鉴于本研究假设年龄和AD都可能是αSyn-SAA阳性的风险因素，将数据集分为早发组（<65岁）和晚发组（早发组：n = 35，25例CBS/10例PSP；晚发组：n = 32，14例CBS/18例PSP）。图A显示了早发组和晚发组中αSyn-SAA与AD状态的关联。在早发组中，AD与αSyn-SAA状态存在显著关联（OR 8.8, 95% CI 1.2-82.6; pBonferroni-adj < 0.05, φ=0.46），AD+患者中αSyn-SAA阳性的比例（5/9）明显高于AD-患者（3/26）。在晚发组中，AD-患者中有一半为αSyn-SAA阳性，而AD+与αSyn-SAA阳性的关联完全消失（OR 0.6, 95% CI 0.1-5.0, φ= -0.10; p = 0.67）
图A. 早发组和晚发组中αSyn-SAA与AD的关联
发病年龄与αSyn-SAA状态对Aβ42水平有显著的交互作用（βStd ± SE 0.34 ± 0.14, p = 0.02）。在αSyn-SAA阳性患者中，较小的发病年龄与Aβ42水平低相关；而在αSyn-SAA阴性患者中Aβ42水平与发病年龄则没有显著关联（见表2，图1B）。
表2. 发病年龄与αSyn SAA状态对Aβ42的显著相互作用
图B. αSyn-SAA 阳性与阴性组间发病年龄对脑脊液Aβ42水平影响的差异
逻辑回归分析：
αSyn-SAA+组和αSyn-SAA-组间的症状总体差异不大（图C）。逻辑回归分析结果显示，快速眼动睡眠行为障碍与αSyn-SAA阳性有关（OR 60.2，95% CI 5.2-1,965.8；p < 0.01）。
图C. CBS和PSP患者在腰椎穿刺时的主要临床特征
本研究在CBS和PSP患者中检测到的αSyn-SAA阳性率与病理学研究结果一致，这突显了SAA在原本无法检测到的神经病理过程的体内检测中的实用性。本研究表明，AD状态（尤其是低Aβ42水平）和发病年龄晚可能促成αSyn-SAA阳性，这为临床试验中的患者分层提供了新的视角。
校 审：商慧芳
