前言 | 优质葡萄酒的生产与葡萄酒葡萄的质量密切相关。在葡萄酒葡萄(Vitis vinifera L.,Vv)中,糖是葡萄品质的关键决定因素,受多种转录因子和关键激酶的相互作用调节。参与糖代谢的许多转录因子仍未得到探索。 雷帕霉素靶蛋白(TOR)是植物中重要的蛋白激酶,最近发现其调节葡萄中的糖代谢。然而,很少报道参与该过程的转录因子或其他因素。 |
本文中,Xia et al 利用基因过表达(oe)和 CRISPR/Cas9 基基因敲除(ko)改造的 'Cabernet Sauvignon' 葡萄果实转基因愈伤组织,发现了一个 bZIP 转录因子 VvRF2b,其敲除导致果糖和蔗糖的积累增加,表明 VvRF2b 是糖积累的负调节因子。
亚细胞定位和转录激活试验表明,VvRF2b 是一种位于细胞核和细胞膜中的转录激活因子。对 'Cabernet Sauvignon' 葡萄果实中 VvRF2b 和 VvTOR 基因水平以及糖含量(葡萄糖、果糖和蔗糖)在开花后 30、70 和 90 天的分析表明,VvRF2b 在果实发育过程中表达更高,而 VvTOR 在糖积累阶段表达更高,此外,koVvRF2b 转基因愈伤组织中 VvTOR 基因水平显着增加,表明 VvRF2b 的敲除与 VvTOR 的过表达之间存在密切关系。
此外,双分子荧光互补和荧光素酶互补试验证明了 VvRF2b 和 VvTOR 蛋白之间的相互作用。在敲除 oeVvTOR 愈伤组织中的 VvRF2b 基因后,发现 VvRF2b 的敲除促进了 VvTOR 调控的蔗糖积累,并增强了 VvTOR 调控的糖代谢相关基因的表达。
总之,本文的结果表明,VvRF2b 与 VvTOR 蛋白相互作用并影响 VvTOR 调控的糖代谢。
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