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**诱导多能干细胞（iPSC）的获取与处理：**首先，从参与者提供的外周血样本中获得诱导多能干细胞（iPSC）。这些细胞被处理成单细胞悬浮液，为后续的类器官培养做准备。
**胚胎体（EB）的形成：**将大约9000个iPSC细胞种植在低粘附性的96孔板中，每孔100微升的胚胎体（EB）培养基，该培养基包含mTeSR 1（干细胞培养基）和50微摩尔的Y27632（一种ROCK抑制剂，用于提高细胞存活率）。
**EB的培养与神经诱导：**每两天更换一次培养基以支持EB的生长和发育。当EB直径达到500-600微米且边界清晰时，将其转移到低粘附性的24孔板中，并加入1毫升的神经诱导培养基，以诱导原始神经上皮细胞的分化。
**静态培养与维生素A的添加：**在不含维生素A的培养基中静态培养4天后，将类器官转移到含有维生素A的培养基中，继续培养直至使用。
**研究TBEV感染对神经发育的影响：**类器官包含了多种类型的脑细胞，能够模拟TBEV感染对神经发育和功能的影响。
**评估TBEV感染引起的神经病理变化：**通过观察感染前后类器官的形态和分子变化，研究人员可以了解TBEV感染引起的神经病理变化。
**测试抗病毒药物的效果：**利用类器官模型，研究人员可以测试不同抗病毒药物对TBEV感染的抑制效果，为药物筛选和治疗策略的开发提供重要信息。
**探索TBEV感染的分子机制：**类器官提供了一个复杂的细胞环境，有助于揭示TBEV感染的分子机制，包括病毒如何与宿主细胞相互作用，以及如何影响细胞信号通路。
多组学整合分析方法：该研究采用了一种综合的多组学方法，包括蛋白质组学、磷酸化蛋白质组学和乙酰化蛋白质组学，来全面分析TBEV感染对宿主细胞的影响。这种方法允许研究者从多个层面理解病毒感染的复杂性，揭示了宿主细胞响应的全貌。
揭示TBEV感染的新分子机制：通过多组学分析，研究揭示了TBEV感染对宿主细胞固有免疫反应、核糖体生物合成、自噬和DNA损伤反应的影响，特别是发现NS5蛋白和prM蛋白在病毒感染中的关键作用，这些发现为理解TBEV的致病机制提供了新的视角。
药物筛选与潜在治疗靶点的识别：研究不仅停留在分子机制的探索，还进一步通过药物筛选实验验证了这些分子事件在TBEV感染中的重要性，并识别了潜在的抗病毒治疗靶点，这为开发新的治疗策略提供了直接的实验依据。
类器官模型的应用：该研究利用类器官模型模拟真实的大脑环境，研究TBEV对神经细胞的影响，这增加了研究的临床相关性，并为研究TBEV的神经致病性提供了一个强有力的工具。
跨学科合作：这项研究涉及病毒学、细胞生物学、分子生物学和药理学等多个学科的交叉合作，体现了现代科学研究中跨学科合作的重要性和创新性。
样本和模型的局限性：研究主要依赖于体外细胞培养和类器官模型，这些模型虽然能够提供有价值的信息，但它们可能无法完全复制人体内复杂的生理和病理环境。因此，研究结果的外推性和临床相关性可能受到限制。
药物筛选的深度和广度：虽然研究筛选了一些药物对TBEV的抑制效果，但药物库可能还不够全面，未能涵盖所有潜在的抗病毒药物。此外，药物的作用机制和长期效果尚未在体内模型中得到充分验证。
病毒与宿主相互作用的复杂性：TBEV与宿主细胞的相互作用极为复杂，涉及众多分子和信号通路。当前研究虽然揭示了一些关键分子事件，但仍有许多未知的相互作用和调控机制需要进一步探索。
长期影响和副作用评估不足：研究主要集中在TBEV感染的急性期效应，对于感染后长期影响和潜在副作用的评估不足。这对于理解病毒的慢性影响和制定长期治疗策略至关重要。
个体差异和宿主遗传背景考虑不足：研究未能充分考虑不同个体间的遗传差异和宿主因素对TBEV感染和治疗响应的影响。个体差异可能会显著影响病毒的感染动态和治疗效果。
这项研究通过多组学分析深入揭示了蜱传脑炎病毒（TBEV）感染对宿主细胞蛋白质组、磷酸化和乙酰化状态的影响，不仅增进了我们对TBEV致病机制的理解，而且为开发新的抗病毒治疗策略提供了潜在靶点和药物，具有重要的科学价值和临床意义。此外，该研究还利用类器官模型模拟TBEV对神经细胞的影响，为研究TBEV的神经致病性提供了强有力的工具，进一步强调了其在推动TBEV研究和治疗领域的重要作用。
肠道类器官（Organoid Bulletin）
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组织介绍
干细胞与类器官创新计划组织（Innovations in stem cell and organoids,ISCO ）是由来自中国科学院、北京大学、清华大学和复旦大学等多个顶级研究机构的头部研究团队组织发起的，完全公益的学术与研究技术交流合作组织，成员主要由来自类器官行业内的企业高管、技术经理、高级PI等构成。加入“ISCO计划”后，您将以极低的成本实现类器官资源的互换与共享，基于肠道类器官和ISCO微信公众号平台，您将获得来自全行业的赋能与指导，进行标准化的类器官制备与检测，保证您的研究顺利且高质量开展。我们会将你纳入ISCO计划微信群，这样您能够与所有参与ISCO计划的成员及时沟通，您所有的类器官问题都能最及时的得到解答和帮助，互换类器官品系和干细胞研究工具资源，解决技术难题，获得技术支持。ISCO已有上千个来自全国顶级类器官研究机构、大学和企业的注册认证会员，大家一起为类器官事业发展点燃星星之火，推动类器官产业发展壮大。在ISCO,我们敢为人先，始终积极寻求更新类器官更优的解决方案，勇于突破经验与预想的界限，致力打造科学卓越的行业新标准。联系邮箱：info@isco.ac.cn
组织愿景
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推动生物材料和工程技术在干细胞与类器官领域的应用与发展。
推动技术进步，推动类器官技术与产品在临床与基础研究中的规模化应用。
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如何加入
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