焦亡是一种溶解性细胞死亡模式，有助于限制感染的传播，也与无菌炎性疾病和自身免疫性疾病的病理有关。在焦亡过程中，炎性体的激活和caspase-1的参与导致细胞死亡，同时炎症细胞因子白介素-1β (IL-1β)的成熟和分泌。IL-1β在促进组织炎症中的主导作用掩盖了从热噬细胞释放的其他因子的潜在影响。本研究中使用一个系统，巨噬细胞被诱导进行焦亡而不释放IL-1β或IL-1α(标记为Pyro−1)，Pyro−1上清液上调了与迁移、细胞增殖和伤口愈合相关的基因特征。与这一基因特征一致，Pyro−1上清液促进原代成纤维细胞和巨噬细胞的迁移，促进体外伤口愈合和体内组织修复。在机制研究中，Pyro−1上清的脂质组学和代谢组学发现了氧化脂质和代谢物的存在，将它们与促进伤口愈合的作用联系起来。特别是氧化脂素前列腺素E2 (PGE2)，发现它的合成是在焦亡，caspase-1激活和环氧化酶-2活性的下游诱导的;此外，PGE2的合成发生在焦亡后期，其释放依赖于焦亡期间打开的气真皮蛋白D孔。热腐代谢物与免疫细胞渗透到伤口，以及CD301+巨噬细胞的极化有关。总的来说，这些数据提出了焦腐分泌组具有组织修复特性的氧化脂素和代谢物的概念，这些特性可能被用于治疗。
在本研究中，作者通过分析焦亡细胞分泌物发现了一类Oxylipins及其他小分子代谢物在促进组织修复中的重要作用，其中PGE2的释放促进了巨噬细胞在伤口的聚集从而加速了组织损伤修复。为了识别独立于IL-1β的焦亡分泌物作用，作者利用了NLRP1B炎症小体在无需TLR引发的情况下诱导焦亡的能力，在这一模型中，炭疽致死毒素（LeTox）通过NLRP1B炎症小体在骨髓来源的巨噬细胞（BMDMs）中诱导焦亡性细胞死亡，而不会引起IL-1β或IL-1α的释放，作者将这种焦亡定义为Pyro-1。为了研究Pyro-1分泌物如何与其他细胞进行交流，他们将LeTox处理的对照和Nlrp1b-Tg（Pyro-1）小鼠来源的BMDMs上清液加入到C57BL/6小鼠的初始BMDMs中孵育4小时，并进行了RNA-seq分析。研究发现，Pyro-1上清液显著富集了与细胞迁移、增殖和免疫反应相关的基因，其中包含了一些与伤口愈合和组织修复相关的基因，如Thbs1、Vegf、Nr4a1、S1pr1和Tgm2等；相比之下，脂质代谢基因呈下调趋势。并且作者发现这些诱导的基因特征是独立于IL-18的，敲除在BMDMs中持续表达的Il-18并不影响Pyro-1上清液诱导的基因表达。接下来，作者分析了Pyro-1上清液中小分子介质是否发挥作用。通过脂质组学分析，研究人员发现Pyro-1上清液中富含Oxylipins，包括PGE2。由于PGE2与伤口愈合有关，所以当添加来自Pyro-1的上清液时，作者发现Pyro-1上清液可以促进细胞划痕的愈合，细胞迁移也得到了有效增强，而这些效应都是独立于IL-18的。对PGE2释放动力学、来源以及释放方式进行研究后，发现：1）LeTox处理后90分钟就可以检测到PGE2，并在120分钟显著增加；2）在焦亡过程中COX1和COX2的活性诱导可能导致了新的PGE2合成和释放；3）焦亡细胞中的PGE2释放需要在焦亡过程中形成的GSDMD孔。此外，作者还研究了Pyro-1上清液在体外的生物活性，他们发现Pyro-1上清液也可以有效促进结肠伤口的愈合。作者更进一步的分析了Pyro-1上清液中小分子在伤口愈合中的作用。他们在小鼠全层皮肤损伤模型中进行了研究，这是因为该模型仅部分依赖于PGE2进行组织修复，使得作者能够研究PGE2及其他成分的贡献。皮内注射Pyro-1上清液时，在损伤后的第2天和第4天（修复的炎症阶段）可以观察到最大的有益效果。当通过添加阿司匹林（抑制PGE2合成）时也可以观察到部分的促进伤口愈合的效果，这表明其他成分也发挥了有助于组织修复的功能。机制上的研究表明，Pyro−1上清液处理的伤口显示出CD45+细胞和CD45-细胞的数量增加，这也符合了在伤口修复早期阶段通常伴随着巨噬细胞和中性粒细胞迅速渗入损伤部位的现象。这些巨噬细胞通过表达凝集素CD301和细胞因子IL-27来发挥促进组织修复的作用。这篇文章探究了焦亡分泌的小分子和代谢物在组织环境中的生理功能，发现了焦亡细胞释放的PGE2和其他小分子在促进组织修复中的意料之外的有益效果。这些发现丰富了人们对焦亡这种程序性细胞死亡在组织中独特作用的认知。
原文链接：
https://doi.org/10.1038/s41586-024-07585-9
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