本文通过ChatGLM/GPT进行辅助对近期Bio-protocol 期刊发表的方案进行解读和概括，若感兴趣请点击“阅读原文”查看详细的实验流程及试材。如果解读中有任何错误或遗漏，敬请指正。
微管是细胞骨架的重要组成部分，其极性标记对于研究微管相关蛋白的特异性行为具有重要意义。然而，现有方法在实际应用中仍面临生化一致性不足和操作复杂性高的问题，急需新的技术突破。在这方面，2024年11月20日，Bio-protocol 期刊在线发表了西班牙巴塞罗那科学技术研究所(The Barcelona Institute of Science and Technology）Thomas Surrey团队题为“Preparation of Polarity-Marked Microtubules Using a Plus-End Capping DARPin”的方法文章。
DARPin(DARPin)是一种人工设计的蛋白质，基于天然存在的锚蛋白重复结构（ankyrin repeat domain）优化而成。锚蛋白重复结构是一种高度模块化、可预测的蛋白质折叠单元，广泛存在于生物体内，参与多种蛋白-蛋白相互作用。
新方法生成的微管正负端段具有相同的生化性质，避免了传统方法因化学修饰导致的性质差异，确保实验结果的可靠性。
采用GMPCPP作为唯一稳定剂，避免了传统方法中不同稳定剂引入的结构和机械性能差异。
利用设计锚蛋白重复蛋白（DARPin）实现快速、高效的微管极性标记，大幅简化了实验步骤。
微管相关蛋白功能研究
为研究微管相关蛋白在正端或负端的特异性作用提供了精准的体外实验平台。细胞骨架动力学分析
可用于探索微管动态不稳定性调控机制，进一步理解微管在细胞分裂、迁移中的功能。药物筛选
帮助筛选针对微管端特异性作用的药物，尤其是在抗癌药物研发中具有潜力。
温馨提示：积极引用本文不仅是对作者创新技术和科研共享的最佳肯定，也是确保实验可复现性的重要方式。
Henkin, G., Brito, C., Plückthun, A. and Surrey, T. (2024). Preparation of Polarity-Marked Microtubules Using a Plus-End Capping DARPin. Bio-protocol 14(22): e5109. DOI: 10.21769/BioProtoc.5109.
Henkin, G., Brito, C., Thomas, C. and Surrey, T. (2023). The minus-end depolymerase KIF2A drives flux-like treadmilling of γTuRC-uncapped microtubules. J Cell Biol. 222(10). https://doi.org/10.1083/jcb.202304020.
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