可变结构域，Fc区，IgG1格式对单抗黏度的作用
可变区（尤其是CDR区）在omalizumab单抗的高粘度中发挥重要作用，在等效质量浓度下，omalizumab单抗相应的F(ab’)2的黏度降低了9.1倍，这表明Fc区域对该抗体的高粘度有显著贡献。相比之下，仅Fc片段的粘度非常低。这些结果表面Fab-Fc可能是omalizumab高粘度的重要促成因素。trastuzumab单抗的黏度明显依赖于完整的IgG1格式。
Fc变异对单抗黏度的影响
研究了一些常用的Fc变体对omalizumab和trastuzumab高浓度黏度的影响，omalizumab中发现YTE（血清半衰期延长），NG（糖基化），LPLIL（效应功能增强）这3种Fc变异体分别使亲本抗体的黏度降低了10.7倍、2.2倍和1.6倍。
与omalizumab相比，Fc变异均未显著降低trastuzumab本已较低的黏度，相反一些Fc变异体增加了trastuzumab的黏度，表明临床阶段抗体中常用的Fc修饰有时可导致不必要的自结合。
Fc变体突变的空间定位与显著的粘度效应
研究人员发现了识别Fc中与自关联相关的拓扑区域，对于omalizumab，降低黏度的变体NG和LPLIL在上部CH2结构域具有溶剂可及的表面残基，以及在CH2和CH3结构域具有面向糖的残基。omalizumab最显著的降低黏度变异型YTE位于CH2/CH3肘部区域。该区域还包含LS突变的位置，LS突变是唯一发现粘度显著升高的omalizumab单抗Fc变异体。omalizumab中影响粘度的突变的空间取向与trastuzumab明显不同。已鉴定的所有显著增加trastuzumab粘度的变体都涉及替换位于上部CH2结构域的残基。
Omalizumab单抗的高黏度因个体YTE突变而得到缓解
通过评估YTE三重突变中所有可能的单一成分突变（M252Y、S254T和T256E）和双重成分突变（M252Y：S254T、M252Y：T256E和S254T：T256E），进一步研究了从YTE三重突变（176 cP到16.4 cP）中奥马珠单抗的黏度大幅降低。通过单个S254T（降低6.1倍）或T256E（降低5.8倍）突变，可以部分重现YTE三重突变导致的Omalizumab黏度大幅降低（10.7倍）。
溶液pH、静电和疏水性影响抗体的粘度
Omalizumab具有强pH依赖性，它的粘度在pH6.0时达到最大值，而在更酸性或更碱性的条件下粘度降低，这表明组氨酸的离子化状态可能对粘度有贡献。
亲本和YTE Fc区的分子动力学分析
M252Y单突变体显示SAP评分大幅增加，相应的双突变体（M252Y：S254T和M252Y：T256E）和三突变体（YTE）的SAP评分增加较小，这一观察结果与在M252Y中观察到的显著粘度增加一致，表明酪氨酸在增强Fc区域的芳香性或疏水性方面发挥关键作用。点突变周围的静电表面APBS评分受到谷氨酸残基存在与否的显著影响。与亲本和其他变体（在Fc环上保持正静电电位）相比，单（T256E）、双（M252Y：T256E和S254T：T256E）和三（YTE）突变体均在指定环内表现出向负静电电位的转变。
Fc的不稳定可能有助于降低抗体的粘度
分析每个变体的Fc区相对于不同MD框架的初始亲本晶体结构的均方根偏差（RMSD），了解Fc点突变如何影响Fc区的结构和构象稳定性。发现亲本Fc相对于晶体结构的环RMSD最低，YTE三重突变体表现出最显著的构象变化和不稳定性，其次是M252Y:T256E双突变体。其他突变体，无论是谷氨酸还是酪氨酸取代，也显示出与亲本Fc相比在相应环内更高的RMSD不稳定性。S254T变体也显示出与亲本Fc相比增强的不稳定性，尽管它低于其他变体。Fc的不稳定可能会通过增加Fab-Fc相互作用的熵成本来破坏分子间相互作用。
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