IL-2抗体/IL-2融合蛋白开发
开发了一种抗IL-2人源化抗体NARA1，将IL-2的N端和C端分别连接在螺旋αA之前和αD之后，从而产生了一个环状排列的IL-2（IL-2CP）。将环状排列的IL-2分子与高亲和力的人源化抗IL-2抗体的轻链可变区（LCDR1）融合，形成抗体-细胞因子融合蛋白。IL-2CP的新N和C末端分别通过甘氨酸-丝氨酸接头与抗体的LCDR1残基Y27d和D30连接。
ANV419对IL-2 Rβγ表达细胞的选择性
在体外刺激的小鼠脾细胞中，ANV419在Tregs的pSTAT5磷酸化中的效力降低，但对CD8+T细胞和NK细胞的活化作用与常规IL-2相当。在体内实验中，单次静脉给药ANV419可以剂量依赖性地诱导CD8+T细胞和NK细胞的增殖，而对Treg细胞几乎没有影响。相比之下，对抗体C融合蛋白则表现出了对Treg细胞的强烈增殖作用。
ANV419可抑制肿瘤生长
H22肝癌肿瘤对ANV419单药治疗反应强烈，ANV419与PD-1或CTLA-4 CPI联合使用时观察到附加肿瘤生长抑制（TGI）。在部分CPI反应性Renca肾细胞癌模型中，使用ANV419单药治疗也实现了显著的TGI，在免疫原性较差的B16F10黑色素瘤模型中仅观察到有限的生长迟缓。Renca中ANV419治疗可显著增强CD8+T细胞和NK细胞对肿瘤的浸润，并且Treg的数量和增殖并没有因ANV419而增加。
使用ANV419也造成NKT细胞（一种表达IL-2Rβγ的细胞类型）增加，但在CD4+T细胞中没有观察到，因为CD4+T细胞在稳定状态下表达的IL-2R水平较低，对IL-2的反应性较低，以及完全缺乏IL-2R表达的B细胞和巨噬细胞。
ANV419其IL-2R信号传导效力和动力学
用ANV419和IL-2刺激后，CD8+T细胞和NK细胞显示出相似的EC50值，但是在Treg中，与IL-2相比，用ANV419治疗后观察到IL-2R介导的信号传导效力降低，说明ANV419对CD8+T细胞和NK细胞的选择性优于对人类细胞中的Tregs。用ANV419刺激的CD8+ T细胞和NK细胞表现出与IL-2相当的pSTAT5动力学，而IL-15的STAT5磷酸化往往比ANV419或IL-2稍快。因此，在CD8+T细胞和NK细胞中，ANV419的IL-2R信号传导效力和动力学与IL-2相当。
ANV419增强NK细胞杀伤能力和ADCC
研究发现用ANV419处理NK细胞不会改变NK细胞受体表面表达水平，但会导致NK细胞的活化状态更高。ANV419处理的NK细胞对NCI-H929骨髓瘤和HCC1954上皮乳腺癌靶细胞的杀伤作用升高。将ANV419和daratumumab或者trastuzumab单抗联合孵育的NK细胞增强了抗体的活性。将它和具有ADCC效应的trastuzumab单抗联合使用，发现其在抑制肿瘤生长方面显示出叠加效应。这些结果表明ANV419增强NK细胞杀伤能力和ADCC。
ANV419半衰期和药理学分析
通过对食蟹猴进行ANV419药理学和毒理学研究，发现ANV419具有延长的半衰期，并促进食蟹猴中CD8+T细胞和NK细胞的增殖。
总结
该研究通过蛋白质工程的方法克服重组IL-2的缺点，基于IL-2与高亲和力的抗IL-2抗体A的融合，通过环状排列策略，保留抗原/抗体的相互作用，仍然允许IL-2 Rβγ的结合和激活，形成融合蛋白ANV419。该激动剂对IL-2 Rβγ具有选择性，单独治疗或与CPI 联合使用可抑制肿瘤生长，增强CD8+T细胞和NK细胞的浸润和扩增。ANV419半衰期延长，毒性适中，并且能够有效抑制同源小鼠模型中的肿瘤生长。该研究为ANV419在实体瘤和血液系统恶性肿瘤中的临床开发提供了理论基础，既可以作为单一疗法，也可以与检查点抑制剂或ADCC诱导疗法联合使用。ANV419目前处于1/2期临床开发阶段，可能为癌症患者提供比白介素更广泛的治疗窗口。
更多服务及产品内容欢迎咨询了解。咨询电话：15387173921(微信同号)。
更多推荐
