Siglec-6的表达
唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素（Siglecs）可通过聚糖识别促进细胞间相互作用并调节先天性和适应性免疫功能。Siglecs的CD33相关亚群（CD33r）主要表达在人体免疫细胞上，如单核细胞、巨噬细胞以及B细胞和NK细胞亚群。Siglec-6是一种CD33r siglec，在胎盘、肥大细胞和组织样记忆B细胞中受限表达，但在naïve B细胞中不表达。与健康供者来源的B细胞相比，它在慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者的白血病B细胞（B-CLL细胞）上过表达，说明Siglec-6是B-CLL特异性标志物，在正常B细胞上表达有限。
Siglec-6的配体sTn及其表达
骨髓是B-CLL细胞在CLL患者体内归巢的主要部位之一，唾液酸Tn（sTn）是一种肿瘤相关的糖类抗原，它是siglece -6的配体，sTn与结肠癌和乳腺癌的不良预后和肿瘤转移相关。sTn对siglece-6的具有很强的结合亲和力。研究人员从CLL患者的骨髓抽吸物和健康供者的髋骨样本中提取CLL-骨髓基质细胞（BMSCs），对经CD73和CD90表达鉴定的BMSCs进行的流式细胞术分析，发现与正常供者相比，CLL患者BMSCs表面sTn的表达显著增加，蛋白免疫共沉淀分析结果也表明sTn在CLL患者BMSCs中过表达。
Siglec-6与鸟嘌呤核苷酸交换因子DOCK8结合
研究人员使用质谱法和免疫共沉淀验证，发现Siglec-6可以与鸟嘌呤核苷酸交换因子DOCK8相互作用。
Siglec-6促进体外CLL细胞的迁移和粘附
体外实验发现，JML-1 Ab阻断了siglec-6+原代B-CLL细胞与sTn+CLL -BMSCs的附着。表明B-CLL细胞与CLL -BMSCs的附着需要siglec-6。Transwell迁移试验表明，与用同种型Ab阻断相比，JML-1抑制了B-CLL细胞向CLL-BMSCs的体外迁移。表明Siglec-6在CLL细胞向肿瘤微环境（TME）的迁移和粘附中起潜在作用。
DOCK8和Siglec-6在CLL细胞迁移中的功能作用
研究人员使用CRISPR-Cas9技术在MEC1-002细胞中建立了DOCK8的稳定敲除，Transwell迁移试验显示，与MEC1-002野生型（WT）细胞相比，MEC1-002 Siglec-6敲除（KO）、MEC1-002 DOCK8 KO和MEC1-002双KO（Siglec-6和DOCK8同时敲低）细胞向CLL-骨髓基质细胞（BMSC） 的迁移显著减少。表明DOCK8在Siglec-6依赖性B-CLL细胞迁移中发挥作用。
靶向Siglec-6的T-biAb对Siglec-6+CLL细胞的体外疗效
使用Siglec-6/CD3双特异性T细胞招募抗体（T-biAb）在体外实验中显示出对Siglec-6阳性CLL细胞的选择性杀伤作用。
靶向Siglec-6的T-biAb在体内模型中的疗效
靶向Siglec-6的T-biAb在免疫能力正常的小鼠模型中，Siglec-6 T-biAb治疗显著提高了总体生存率。
小结
该研究发现siglece-6促进B-CLL细胞的迁移和粘附，这是通过siglece-6与DOCK8在siglec-6配体sTn依赖性肌动蛋白聚合中通过Cdc42激活和WASP蛋白募集的相互作用介导的。Siglec-6靶向的双特异性T细胞招募抗体（T-biAb）在小鼠模型中显著提高了总体生存率，并在患者衍生的异种移植模型中有效消除了CLL细胞。siglec-6靶向T-biAb可以特异性消除siglec-6+CLL细胞，并提供生存益处，从而支持临床评估siglec-6靶向治疗CLL患者的基本原理。
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