中国自体血清滴眼液治疗角膜及眼表疾病专家共识(2020年）

目前临床普遍认为自体血清治疗角膜及眼表疾病的机制主要包括两个方面，一是其成分和生物学特性与泪液非常相似，不仅可以作为泪液的替代品，更可以在稳定泪膜方面发挥十分重要的作用；二是血清中含有丰富的生长因子、维生素和免疫球蛋白等，其蛋白总浓度是泪液的10倍，能够促进角膜上皮细胞增殖分化和神经修复，对治疗角膜及眼表疾病有重要作用；此外，其还含有抗体、补体和溶菌酶等，具有抑菌、杀菌的作用（表1）。

表1

（一）适应证

自体血清滴眼液在改善眼表主观症状、泪液参数和加快角膜上皮修复等方面具有良好疗效，但是鉴于需要取自体血进行制备，且保存时间较短，建议在临床常规商品化药物滴眼液治疗无效时，再及时选择自体血清滴眼液治疗。

自体血清滴眼液主要适用于治疗4类角膜及眼表疾病（表2）：（1）常规眼药制剂治疗效果不佳或无效的重度角膜及眼表疾病；（2）眼表损伤（急性期）；（3）眼表重建、角膜移植等手术的支持治疗；（4）角膜感觉异常和疼痛。

（二）禁忌证

1.各种感染性角膜和眼表疾病（感染控制后的修复期除外）。

2.角膜穿孔。

3.角膜化学性眼外伤、热烧伤和辐射性损伤后已出现角膜基质自融。

4.在角膜及眼表原发疾病未控制的情况下，单纯应用自体血清滴眼液。

由于自体血清滴眼液制备需要抽取供体血液，有时还需多次抽取，因此血清供体的最低血红蛋白浓度应高于110g/L（红细胞压积≥33%）。若患者自身合并以下疾病或状态，则不宜抽取自体血清制备滴眼液。

1.血液系统疾病：贫血、白血病、真性红细胞增多症及各种出、凝血性疾病。

2.心血管系统疾病：不稳定性心绞痛、近期发生心肌梗死或脑血管意外、主动脉狭窄等。

3.呼吸系统疾病：肺气肿、支气管扩张以及肺功能不全等。

4.消化系统疾病：较严重的胃及十二指肠溃疡、胰腺炎等。

5.泌尿系统疾病：急性和慢性肾炎、肾病综合征以及急性和慢性肾功能不全等。

6.传染性疾病：病毒性肝炎（包括乙型肝炎表面抗原阳性、丙型肝炎病毒抗体阳性）、获得性免疫缺陷综合征、梅毒等。

7.全身感染性疾病：败血症和脓毒血症等。

8.各种恶性肿瘤及影响健康的良性肿瘤。

9.拔牙或其他小手术后未满半个月；阑尾切除术、疝修补术及扁桃体等手术后未满3个月；心、肝、肾等脏器手术后未满半年。

10.妇女妊娠期和儿童。

11.年老体弱者不耐受失血。若以上患者需要血清滴眼液治疗眼部疾病，可使用直系亲属异体血清或脐带血，也可选择商品化的牛血清眼用制剂替代。

（一）必备物品

1.设备及仪器：血清的配制应该在相对无菌的房间进行。室内配有离心机等设备。

2.材料：无任何添加剂的无菌真空采血管、采血针、无菌眼液瓶、一次性无菌注射器、橡胶管、消毒棉签、1%碘伏、生理盐水等。

（二）制备人员条件

目前一般由眼科医师或护士完成配制工作，若有检验科技师配合操作则更好，但是建议应由专人配制。配制血清滴眼液的工作人员应熟知配制过程和要领，能熟练操作离心机，掌握无菌操作技能，并能通过自己的判断对制备过程中出现的各种情况做出相应的分析及处理。配制时工作人员须佩戴口罩、无菌手套和帽子。

（三）制备过程

自体血清滴眼液的制备、储存和使用均应严格遵守无菌原则。自体血清滴眼液的制备程序应包括采血对象知情同意、血清学检测、无菌采血、静置凝血、离心分离血清、稀释分装和微生物学检测，最后投入使用。

1.制备前准备：临床医师应详细询问患者病史，排除全身和眼部禁忌证，获得患者或监护人的知情同意并签署知情同意书；对患者进行血清病原体（丙型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、梅毒螺旋体、人类嗜T细胞病毒）及常规项目（血常规检查项目、C反应蛋白、血清淀粉样蛋白A、丙氨酸氨基转移酶、类风湿因子、抗链球菌溶血素O）检测，排除血源性感染疾病。

2.采血：常规消毒肘部皮肤2或3次，从患者肘前静脉采血25~100ml，其中10ml用于血清病原体及常规项目检测，其余部分置于无抗凝剂的无菌真空采血管中。采血完毕后，用消毒棉签按压肘部穿刺部位止血。

3.静置：无菌真空采血管置于室温下，直立静置至少2h使其凝结。静置时间会影响血清中表皮生长因子、转化生长因子β1等生长因子的浓度，静置时间越长，获得的血清量及其上皮营养性因子的含量越高。研究结果表明全血在室温下放置2h以上，血清成分中的表皮生长因子、转化生长因子β1浓度显著增高。为了增加血清析出量，建议全血至少在室温下放置2h，继续延长静置时间并不能明显增加血清中生长因子的含量及离心后的血清量。

4.离心：将凝结后的血离心，析出血清。高转速长时间离心可使自体血清滴眼液中表皮生长因子的浓度增高而转化生长因子的浓度降低。因此，以促角膜上皮修复为主要目的时，可适当提高离心的转速和时间，建议3000×g离心10~15min；以抗炎为主要目的时，可适当降低离心的转速和时间，但不应低于1200×g，时间不少于5min。按此方案，100ml的全血将产生30~40ml的血清。

5.稀释：采血管外壁用消毒湿巾消毒，将采血管转移至生物安全柜中进行操作。用一次性无菌注射器取出上层血清（注意针头切勿接触下层红细胞及管外壁），用0.9%生理盐水稀释至浓度为20%。稀释后的自体血清中转化生长因子浓度降低，可减轻其对上皮修复的抑制作用。若用于以抗炎为主要目的的治疗，则可稀释至50%，还可联合使用抗生素或糖皮质激素。

6.分装：将稀释后的血清分装到准备好的无菌眼液瓶中，每瓶约1ml，标记患者基本信息（姓名、年龄、性别）、配制日期、配制人及有效期。

7.检测：对制备好的自体血清滴眼液抽样进行微生物培养，时间为48h。若培养结果为阳性须丢弃。发放合格的自体血清滴眼液时应告知患者使用时的无菌操作方法和个体化原则（即自体血清只能用于患者本人），以避免制剂污染和交叉感染。

（四）储存

自体血清滴眼液分装后须立即置于冰箱中避光保存（4℃保存1周，-20℃保存3个月），有条件者可采用锡箔纸包装以避光。在冰箱冷冻保存时，须准备洁净的独立隔层单独存放自体血清滴眼液，避免被其他物品污染。

-20℃冷冻保存的自体血清滴眼液在使用前须先置于4℃解冻。若从-20℃直接置于室温下解冻，有时会在自体血清滴眼液中析出沉淀。解冻复温后，不可再放入-20℃冰箱。开瓶24h后丢弃。

建议自体血清滴眼液的点眼频率为1次/2h；临床医师可根据病情的严重程度，加用至1次/h；在病情缓解时，可适当降低点眼频率，每天2次直至病情稳定。对于角膜上皮病变严重者，建议采用浓度序贯疗法，即先用高浓度（50%~100%）治疗，待角膜上皮修复后，改为低浓度（20%）维持治疗。点眼时须悬空滴入，瓶口不能接触睫毛或眼睑。开瓶后不能过夜使用。血清容易变质，如发现颜色异常、混浊，须丢弃。使用过程中若患者出现以下情况应停用。

1.使用2周无效（角膜疼痛或角膜感觉异常者除外，此类患者往往需要更长疗程，大多数在3~4个月内出现治疗反应，部分患者甚至需要更长时间才能有效果）。

2.使用过程中出现过敏反应或感染。

3.在用于恢复角膜上皮完整性时（如治疗复发性角膜糜烂、持续性角膜上皮缺损等），角膜上皮完全愈合。

4.眼睑皮肤湿疹。

5.类风湿关节炎患者使用后出现巩膜融解。

6.反复抽血引起贫血。应用自体血清滴眼液可替代人工泪液或适度减少人工泪液的使用量，但不可替代其他药物（如抗生素、糖皮质激素、其他抗炎药物等）。

自体血清滴眼液来自患者本人，安全可靠，避免了来自其他患者的交叉感染以及错误标记风险。由于自体血清滴眼液中不添加防腐剂，制备、储存及使用过程中应注意无菌操作，以防止微生物污染。

临床应用自体血清滴眼液极少出现并发症，具有良好的耐受性。Fox等报道类风湿关节炎患者用药后出现巩膜融解。少量文献报道100%浓度血清频繁应用（1次/h）可出现免疫复合物沉积，24h内出现周边角膜浸润和溃疡；此外，100%浓度的自体血清滴眼液也可能引起轻微不适感和局限性上皮下浸润，但随着上皮愈合，浸润消失，并不会遗留混浊和瘢痕。因此，本共识不推荐使用高浓度自体血清滴眼液，稀释浓度以20%~50%为宜。

眼部点用自体血清滴眼液是一种治疗角膜及眼表疾病非常有效的方法，其能够提供大量活性物质（各种生长因子等），模拟天然泪液的功能，促进角膜和结膜上皮细胞增殖、迁移和分化，已被大量研究结果证明安全、有效且耐受性好。然而，目前国际上尚无统一的自体血清滴眼液制备标准和使用指南。本共识阐述了自体血清滴眼液制备、储存和使用规范，其有效性和安全性亟待短期、中期和长期随访的随机对照双盲研究结果加以证实，以便进一步使治疗和使用标准化。

文献来源：

中华医学会眼科学分会角膜病学组

通信作者：史伟云，山东第一医科大学（山东省医学科学院）山东省眼科研究所 山东省 眼科学重点实验室‐省部共建国家重点实验室培育基地 山东第一医科大学附属眼科医 院，济南 250021，Email：wyshi@sdfmu.edu.cn

中华医学会眼科学分会角膜病学组.中国自体血清滴眼液治疗角膜及眼表疾病专家共识(2020年)[J].中华眼科杂志, 2020, 56(10):6.

DOI:10.3760/cma.j.cn112142-20200713-00474.