采用流式细胞术分析血液和组织中的 T 细胞亚群。 运用 Luminex 技术检测血清细胞因子水平。 通过光片荧光显微镜（LSFM）对全身或器官进行 3D 成像，观察组织中细胞分布。 对成像后的组织进行常规 2D 组织学处理和切片扫描，分析免疫组化染色结果。
TCM 在患者中与 CXCL10 和 sBCMA 水平相关
Forimtamig 在 huNSG 小鼠中引起快速 TCM 且与全身细胞因子释放
对 huNSG 小鼠给予 forimtamig 治疗，0.1mg/kg 和 8mg/kg 剂量均在 4h 后引起外周血 CD3⁺ T 细胞计数急剧下降，24h 达到最低点，72h 后 0.1mg/kg 剂量组 T 细胞水平恢复，8mg/kg 组仍接近最低点，168h 两组均接近基线水平，TCM 对 CD4⁺和 CD8⁺亚群影响相同，且在荷瘤和无瘤小鼠中均明显，与全身细胞因子释放无关，肿瘤依赖的全身促炎细胞因子增加发生在 24h 后。 通过 3D LSFM 未发现 forimtamig 在肿瘤外组织的特异性结合，确定 0.1mg/kg 剂量用于后续分析。
T 细胞边缘化先于肿瘤炎症反应和免疫细胞招募
治疗后 4h 和 24h，NCI - H929 皮下肿瘤中 T 细胞浸润稀少，72h 显著增加并在血管周围聚集，与血清中 CXCL10 和 IFNɣ上升时间一致。 治疗后 4h，肿瘤中 ICAM - 1 表达稳定，24h 开始增加，72h 显著升高，而肺和肝中 T 细胞数量和 ICAM - 1 水平无显著变化，表明 TCM 与肿瘤招募、炎症和外周器官的渗出无关。
全身 LSFM 成像显示 CD4⁺ T 细胞在骨髓中积累
Forimtamig 在全血中具有低水平 GPRC5D 特异性 T 细胞结合活性
本研究有助于理解 TCM 作为 TCB 类药物的关键特征，未来可通过新型非侵入性 T 细胞追踪方法，将临床前发现转化应用于患者。
参考资料
Eckmann J, Fauti T, Biehl M, Zabaleta A, Blanco L, Lelios I, Gottwald S, Rae R, Lechner S, Bayer C, et al. Forimtamig, anovel GPRC5D-targeting T-cell bispecific antibody with a2+1 format, for the treatment of multiple myeloma. Blood. 2024. doi:10.1182/ blood.2024025987
Eckmann J, Hage C, Stefanie L, Bayer C, Klein C, Umana P. Early intervention with Celmods, but not imids, prevents relapse to forimtamig driven by GPRC5D-Negative myeloma cells. Blood. 2023;142(Supplement 1):4659–4659. doi:10.1182/blood-2023- 174253
Nils O’Brien, Joerg P.J. Mueller, Ann-Marie E. Bröske, Jan Attig, Franz Osl, Cylia Crisand, Ann-Katrin Wolf, Richard Rae, Stefanie Lechner, Thomas Pöschinger, Christian Klein, Pablo Umaña, Sara Colombetti, Andreas Beilhack & Jan Eckmann (2025) T cell margination: investigating the detour of T cells following forimtamig treatment in humanized mice, mAbs, 17:1, 2440578, DOI: 10.1080/19420862.2024.2440578
