定义：NETs 是中性粒细胞在受到病原体、细胞因子、免疫复合物等刺激时发生的一种特殊的细胞死亡方式（NETosis）过程中释放到细胞外的纤维状结构。
组成成分：主要由 DNA 骨架、组蛋白以及多种中性粒细胞颗粒蛋白组成。其中，DNA 为 NETs 提供了结构基础，组蛋白具有抗菌活性，能够直接杀伤病原体；中性粒细胞颗粒蛋白包括髓过氧化物酶（MPO）、弹性蛋白酶、组织蛋白酶 G 等，这些蛋白赋予了 NETs 多种生物学功能，如杀菌、调节炎症反应等。
NETs 促进促转移生态位中B 细胞扩增
实验模型构建：使用卵巢癌小鼠模型（如通过向小鼠卵巢囊内注射 ID8 细胞构建），包括 NETs 形成能力正常的小鼠和 NETs 缺陷的小鼠，以及通过药物（如 GSK484 抑制 PAD4）处理的小鼠模型，还涉及多种细胞系（如 ID8、BPPNM）和不同基因型小鼠（如 muMT、VertX、CD45.1、Il10 - KO 等）进行实验。 NETs 对促转移生态位中 B 细胞数量的影响：在卵巢癌小鼠模型中，对比和小鼠，发现肿瘤形成三周后，两组原发肿瘤大小无显著差异，但小鼠网膜中脂肪相关淋巴样聚集体（FALCs）显著增大，其中 B 细胞数量增加最为明显（增加 4 倍），而小鼠中 B 细胞数量无显著增加；使用药物抑制 NETs 形成后，B6 小鼠网膜中的 B 细胞数量显著减少，进一步证明 NETs 可增加前转移网膜中的 B 细胞数量。
不同类型 B 细胞特征及分布：在健康小鼠中，约 50% 的网膜 B 细胞为 CD43⁺，多数为 IgM⁺IgD⁻且 B220⁺；在肿瘤小鼠中，CD43⁺网膜 B 细胞数量增加，比例略有下降，而 CD43⁻ B 细胞数量在两组肿瘤小鼠中均增加，但增加幅度较小。在不同组织中，CD43⁺和 CD43⁻ B 细胞的变化趋势不同，如在肠系膜和脾脏中变化不显著，在肿瘤小鼠腹腔中 CD43⁺ B 细胞数量减少。 NETs 对 CD43⁺和 CD43⁻ B 细胞的影响差异：通过药物抑制 NETs（如 GSK484 处理）和使用不同肿瘤模型（如 ID8、BPPNM）实验发现，无论肿瘤细胞来源和突变情况如何，CD43⁺ B 细胞对 NETs 更为敏感，在 NETs 存在时其数量增加更为显著；在人类早期高级别浆液性卵巢癌（HGSOC）患者的组织中，CD43⁺ B 细胞比例也显著增加，同时伴有 NETs 形成，进一步表明 NETs 优先增加先天样 CD43⁺ B 细胞。
NETs 对 B 细胞增殖和存活的影响：通过体内 BrdU 掺入实验和体外 CFSE 染色实验发现，在卵巢癌小鼠模型中，网膜中的 B 细胞增殖不明显，且体外实验表明 NETs 刺激不会增加 B 细胞的增殖或存活，提示 NETs 可能通过其他方式增加网膜中 B 细胞数量。 NETs 诱导 B 细胞迁移的机制：通过将 B 细胞过继转移到不同处理的小鼠（如 muMT 小鼠）体内实验发现，NETs 可促进 CD43⁺ B 细胞从腹腔向网膜迁移，而对 CD43⁻ B 细胞迁移影响较小；进一步研究发现，NETs 可诱导网膜间皮细胞表达 CXCL13，而 CD43⁺ B 细胞表面 CXCR5 表达水平较高，且肿瘤小鼠网膜中 CXCL13⁺细胞增多，抑制 NETs 形成可降低 CXCL13 表达，表明 NETs 通过诱导 CXCL13 表达吸引 CD43⁺ B 细胞迁移至网膜。
B 细胞对前转移网膜中 T 细胞组成的影响：在卵巢癌小鼠模型中，和小鼠网膜中总 T 细胞数量均增加，但小鼠中调节性 T 细胞（Treg）数量和比例增加更明显，Th1 细胞比例降低，导致 Treg/Th1 比例显著升高；使用药物抑制 NETs（如 GSK484 处理 B6 小鼠）可降低网膜中 Treg/Th1 比例，且在 muMT 小鼠中 NETs 对 Treg/Th1 比例的调节依赖于 B 细胞存在。
CD43⁺ B 细胞的功能验证：通过向小鼠过继转移不同类型 B 细胞实验发现，CD43⁺ B 细胞可增加前转移网膜中 Treg 数量和 Treg/Th1 比例，而 CD43⁻ B 细胞无此作用；在 muMT 小鼠中，接受 CD43⁺ B 细胞的小鼠出现网膜转移，而接受 CD43⁻ B 细胞或无 B 细胞的小鼠未发生转移，表明 CD43⁺ B 细胞可促进网膜转移，且这种作用与增加 Treg/Th1 比例有关。
NETs 对 CD43⁺ B 细胞 IL - 10 表达的影响：在人类早期 HGSOC 患者网膜组织中，部分患者的 CD19⁺CD43⁺细胞可检测到 IL - 10；在小鼠实验中，小鼠肿瘤相关网膜中 CD43⁺ B 细胞的 Il10 mRNA 水平升高，而 CD43⁻ B 细胞无明显变化；通过使用 Il10 - eGFP 报告基因小鼠发现，肿瘤小鼠网膜中 CD43⁺ B 细胞中 Il10 - eGFP⁺细胞比例增加，且 NETs 可在体外刺激 CD43⁺ B 细胞表达 IL - 10，但对 CD43⁻ B 细胞作用较小。
IL - 10 在 CD43⁺ B 细胞促进转移中的作用：通过向 muMT 小鼠过继转移野生型或 Il10 - KO 的 CD43⁺ B 细胞实验发现，野生型 CD43⁺ B 细胞可增加网膜中 Treg 数量和 Treg/Th1 比例，促进转移，而 Il10 - KO 的 CD43⁺ B 细胞无此作用，表明 CD43⁺ B 细胞产生的 IL - 10 可增加前转移网膜中 Treg/Th1 比例并促进转移。
NETs 对 BCR 信号通路及相关分子的影响：NETs 刺激可诱导 CD43⁺和 CD43⁻ B 细胞中 BCR 复合物重排，以及 ERK1/2、p38 MAPK 和 NF - κB p65 磷酸化；但在 CD43⁺ B 细胞中，NETs 可促使 CD22 聚集，抑制 CD22 与 SHP - 1 的结合，降低 SHP - 1 磷酸化（Tyr564），从而增加 SHP - 1 底物（如 BLNK、SLP - 76 和 STAT3）的磷酸化，而在 CD43⁻ B 细胞中这些变化不明显。
SHP - 1 抑制对 IL - 10 产生的影响：使用 SHP - 1 激动剂 SC - 43 处理细胞发现，其可抑制 NETs 诱导的 STAT3 磷酸化，并部分阻断 NETs 对 CD43⁺ B 细胞 IL - 10 产生的刺激作用，表明 NETs 通过抑制 SHP - 1 活性部分刺激 CD43⁺ B 细胞产生 IL - 10。
NETs 对 B 细胞中 ROS 产生的影响：NETs 刺激可显著增加 CD43⁺ B 细胞中的总 ROS 和线粒体 ROS 水平，而对 CD43⁻ B 细胞无明显影响；使用 ROS 清除剂 N - 乙酰半胱氨酸（NAC）和线粒体氧化还原抑制剂 MitoQ 可分别抑制 NETs 诱导的总 ROS 和线粒体 ROS 增加；同时，NETs 刺激可诱导 CD43⁺ B 细胞中多个氧化应激反应基因表达上调。 ROS 在 IL - 10 产生中的作用：通过 “生物素转换” 方法检测发现，NETs 刺激可增加 CD43⁺ B 细胞中蛋白质 S - 亚硝基化水平，且 NETs 刺激后 CD43⁺ B 细胞中氧化型 SHP - 1 水平增加；使用 NAC 处理可抑制 NETs 诱导的 CD43⁺ B 细胞 IL - 10 产生，表明 ROS 参与 NETs 诱导的 SHP - 1 氧化和 IL - 10 产生过程。此外，NETs 中的蛋白质（如 MPO 和组蛋白）可诱导 CD43⁺ B 细胞产生 ROS、蛋白质 S - 亚硝基化和 IL - 10，且 NAC 可抑制这些诱导作用，进一步证明 NETs 通过增加 ROS 诱导 CD43⁺ B 细胞产生 IL - 10。
