在免疫检测中,患者样本中存在多种异嗜性抗体和类风湿因子(RF)会通过与抗体的非特异性结合而降低检测的灵敏度和特异性,导致诊断出现假阳性或假阴性结果。
因此,想要提高免疫诊断检测的准确性和特异性,使用专门的免疫阻断剂来降低这些非特异性干扰引起的错误结果是必不可少的。
固相定量免疫分析比如ELISA、层析法和Western blot都是将抗体固定于一个表面。其它蛋白质或生物分子与该表面的非特异性结合会降低试验的特异性和灵敏度。
固相阻断剂专门用于使未被结合的结合位点饱和,从而防止非特异性结合,同时增加检测灵敏度。在样品制备过程中再使用其它阻断剂来防止干扰抗体与试验抗体成分结合。
夹心免疫分析使用两种抗体(单抗或多抗)来结合抗原或待测分析物上的不同位点。捕获抗体对抗原的结合亲和力通常是免疫分析灵敏度的主要决定因素。
但是,样本中存在的内源性干扰物质,主要是异嗜性抗体(HA)、人抗动物抗体(HAAA)和类风湿因子(RF)会通过与抗体的非特异性结合而降低检测的灵敏度和特异性,导致假阳性或假阴性结果。
最常见的干扰类型是异嗜性抗体(HA)是自然生成的亲和力较低的人抗体,可与不同物种的免疫球蛋白发生反应, 包括小鼠、山羊、小兔、绵羊和小鸡。在诊断试验中,HAs能够与多个看似不相关的表位结合来破坏试验的特异性抗原抗体作用。
人抗鼠抗体 (HAMA) 是其中一种HA干扰, 与小鼠抗体特异性结合。由于商用诊断免疫分析较多使用小鼠单克隆抗体, 所以 HAMA 干扰是最多见的一种类型。
易受内在干扰影响的检测包括双夹心抗原检测,竞争法和lgM捕获检测。文献中已报道的具体例子有ToRCH、CEA、CA-125、CK-MB、LH、FSH、催乳素、TSH、AFP、心脏肌钙蛋白I (cTnl) 和hCG等试验。
迈迪安生物全球最大免疫阻断剂生产商
适用于混种实验(例如MAb/PAb)
阻断剂的种类必须与捕获抗体或检测抗体宿主种类一致
小鼠IgG是最常见的被动阻断剂
迈迪安具有全球最大的小鼠IgG年产能,保证供应链和批间差
被动阻断剂通过提供替代结合位点阻止干扰抗体与捕获抗体或检测抗体结合。动物 IgG (例如, 羊 IgG) 只能阻断一种干扰类型 (例如, 人抗羊抗体), 因此通常需要不止一种 IgG, 这取决于捕获抗体和检测抗体的宿主。
必须添加过剩浓度的动物 IgG, 其效果取决于干扰抗体与动物 IgG 的亲和力。
产品 | 产品编号 | 蛋白浓度 |
小鼠IgG | A66186M | 9-13 mg/mL |
小鼠IgG | A66185M | 50-55 mg/mL |
小鼠IgG (无叠氮化物) | A66189M | 45-55 mg/mL |
山羊IgG | A66200H | 8-12 mg/mL |
大鼠IgG | A64391R | 10-14 mg/mL |
大鼠IgG | A41182R | ≥60 mg/mL |
兔IgG | A66100H | 8-12 mg/mL |
绵羊IgG | A66400S | 70-77 mg/mL |
用于双鼠单克隆检测
去除HAMA,HA & RF干扰
迈迪安专利生产的主动阻断剂TRU Block™系列阻断剂有一种针对所有类型嗜异性干扰包括HAMA和RF的特异性粘合剂, 能够显著减少试验干扰和改善试验结果。一旦与干扰抗体结合, TRU BlockTM 会通过位阻进一步阻止HA与其它试验成分结合。
产品 | 产品编号 | 蛋白浓度 |
TRU Block™ | A66800H | 24-26mg/mL |
TRU Block™ 2 | A66802H | 24-26mg/mL |
TRU Block™ 3 | A66803H | 24.3mg/mL |
TRU Block™ ULTRA | 8000 | 24-26mg/mL |
产品 | 产品编号 |
非鼠源IgG | BN1300 |
K-BlockTM (非鼠源主动阻断剂) | BN1200 |
在IgM捕获法检测中,常会受到两种干扰:
1. 来自高水平的患者lgG抗体,与lgM 竞争固相上的抗原结合位点。lgM 抗体在体内所有抗体中只占5%-10%,而 lgG 抗体非常丰富, 约占人血清抗体的 75-80%,因此它们凭借绝对数量优势在竞争中胜过 lgM。
2. 由lgM RF导致, 通过与免疫球蛋白上的Fc片断反应而产生假阳性信号。RF见于 1%-4% 的普通人群和 75% 的 65 岁以上成人患者。
因此需要使用Ig阻断剂增加免疫检测IgM的灵敏度。 迈迪安的 IgG 吸附剂是用免疫电泳法检测的, 以确保IgG特异性和不与 IgM或IgA交叉反应。
产品 | 产品编号 |
山羊抗人IgG Fc | L15406G |
IgG检测稀释液 | 8120 |
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