高参数流式,包括流式质谱,荧光光谱流式,荧光分光流式。流式质谱,目前最多做到51个指标,包括:细胞死活*2,DNA染色*2,抗原*47。荧光分光流式,最高配置48个PMT,目前发表文章最高为29色。根据公众号【流式通】的统计,市场上可见的荧光光谱流式制造商主要有以下10家。我们看看目前光谱流式发表的40色以上的文章,来回答这个问题。顺便说一下,国内品牌的光谱流式,文章鲜见,也还没有突破26色以上。Cytek-40色&45色
2020年,Cytometry Part A发表了一个40色的光谱流式方案:OMIP-069,深入分析CD4和CD8 T细胞、调节性T细胞(Tregs)、γδ T细胞、NKT样细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞、嗜碱细胞、固有淋巴细胞(ILCs)和树突状细胞的比例、表型、亚群。该文获得了Cytometry Part A年度最佳文章奖。2024年,同一作者基于OMIP-069的40色文章,保留了原方案37个指标,新加入8个指标,横向评估了T、B、NK、NKT、单核、嗜碱性粒、先天淋巴样(ILCs)、树突状(DCs)等细胞,纵向剖析了T细胞活化、抑制、归巢、组织驻留、记忆和效应分化等指标,勾勒出人外周血免疫表型的精细图谱。
BD-50色
OMIP-102 BD50色方案主要评估抗原递呈细胞和T细胞的表型鉴定。- 349nm对应22个APD光谱检测通道,本方案激发10色
- 405nm对应20个APD光谱检测通道,1个前向散射,1个侧向散射,本方案激发12色
- 488nm对应16个APD光谱检测通道,3个荧光成像通道,1个前向散射,2个侧向散射,本方案激发12色
- 561nm对应12个APD光谱检测通道,本方案激发9色
- 637nm对应8个APD光谱检测通道,本方案激发7色
Sony-45色
Sony的45色Panel,包含所有主要免疫细胞亚群的谱系标记,以及一组广泛的表型标记,重点关注T细胞和树突状细胞(DC)的激活和分化状态。这一方案相比以上50色方案,删减了CD40、IgM、IgG、CD183和KLRG1。Agilent-45色
在OMIP-069加CD45RO\CD33\CD233\CD69\CD31 综合以上5个方案的信息,可以看到,光谱流式可以更加全面表征免疫细胞亚群,在有限的样本中获得更多信息。- BD公司提供新型荧光染料Brilliant系列和Real Blue系列,尤其BUV和BV是紫外激发和紫光激发必不可少的染料。
- Cytek公司提供的cFluor系列染料,为黄绿激光、蓝激光、红激光激发提供了另一种选择。
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