被禁!高参数流式细胞仪之荧光光谱流式

创业   2025-01-22 10:34   浙江  

高参数流式,包括流式质谱,荧光光谱流式,荧光分光流式。
流式质谱,目前最多做到51个指标,包括:细胞死活*2,DNA染色*2,抗原*47。
荧光分光流式,最高配置48个PMT,目前发表文章最高为29色。
荧光光谱流式,目前发表文章最高为5激光50色。
见下图。
根据公众号【流式通】的统计,市场上可见的荧光光谱流式制造商主要有以下10家。
国内部分,可以看这篇文章:国内流式细胞仪制造商有多少?
那么,光谱流式能做什么,怎么实现呢?
我们看看目前光谱流式发表的40色以上的文章,来回答这个问题。
顺便说一下,国内品牌的光谱流式,文章鲜见,也还没有突破26色以上。

Cytek-40色&45色

 

2020年,Cytometry Part A发表了一个40色的光谱流式方案:OMIP-069,深入分析CD4和CD8 T细胞、调节性T细胞(Tregs)、γδ T细胞、NKT样细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞、嗜碱细胞、固有淋巴细胞(ILCs)和树突状细胞的比例、表型、亚群。该文获得了Cytometry Part A年度最佳文章奖。
OMIP专栏 Round 7 | 40色流式方案检测人外周血中免疫细胞精细亚群分型(OMIP-069)
2024年,同一作者基于OMIP-069的40色文章,保留了原方案37个指标,新加入8个指标,横向评估了T、B、NK、NKT、单核、嗜碱性粒、先天淋巴样(ILCs)、树突状(DCs)等细胞,纵向剖析了T细胞活化、抑制、归巢、组织驻留、记忆和效应分化等指标,勾勒出人外周血免疫表型的精细图谱。
高质量数据新标准,Cytek谱写45色全光谱流式方案二重奏(分析+分选)


BD-50色

    

OMIP-102 BD50色方案主要评估抗原递呈细胞和T细胞的表型鉴定。
BD-OMIP专栏 | 光谱流式50色方案,全面鉴定免疫细胞的有力方案
仪器及配置
FACSDiscover S8
  • 349nm对应22个APD光谱检测通道,本方案激发10色
  • 405nm对应20个APD光谱检测通道,1个前向散射,1个侧向散射,本方案激发12色
  • 488nm对应16个APD光谱检测通道,3个荧光成像通道,1个前向散射,2个侧向散射,本方案激发12色
  • 561nm对应12个APD光谱检测通道,本方案激发9色
  • 637nm对应8个APD光谱检测通道,本方案激发7色


Sony-45色

 

Sony的45色Panel,包含所有主要免疫细胞亚群的谱系标记,以及一组广泛的表型标记,重点关注T细胞和树突状细胞(DC)的激活和分化状态。
这一方案相比以上50色方案,删减了CD40、IgM、IgG、CD183和KLRG1。
Sony ID7000™ 45c Panel进行免疫全景分析


Agilent-45色

  

 OMIP-069加CD45RO\CD33\CD233\CD69\CD31  
值得收藏 | Agilent NovoCyte Opteon 45 色流式方案抢先看

仪器及配置:NovoCyte Opteon
本方案激光及通道
  • 349nm激发8色
  • 455nm激发11色
  • 488nm激发10色
  • 561nm激发9色
  • 637nm激发7色
综合以上5个方案的信息,可以看到,光谱流式可以更加全面表征免疫细胞亚群,在有限的样本中获得更多信息
荧光染料是光谱流式的关键控制点之一。比如:
  • BD公司提供新型荧光染料Brilliant系列和Real Blue系列,尤其BUV和BV是紫外激发和紫光激发必不可少的染料。
  • Cytek公司提供的cFluor系列染料,为黄绿激光、蓝激光、红激光激发提供了另一种选择。




光谱流式制造商安捷伦
文章来源于陈在不在,作者流式九哥

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