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NK细胞治疗技术是细胞治疗的主要技术之一，在人机体健康及癌症治疗方向被广泛研究应用。NK细胞治疗技术由来已久，尤其是未进行基因改造的NK治疗技术。同时，随着细胞治疗技术的发展，NK治疗技术呈现多元化，多种基于NK的治疗新技术不断推出，其中最具代表性的当属CAR-NK技术，是未来癌症治疗技术研究的重要方向。
不同于CAR-T细胞治疗技术，NK细胞治疗对实体瘤同样有效。再者，NK其免疫原性低，异体移植安全性高，具备更高的通用性，可以作为现货型细胞治疗产品进行规模化大批量生产。与此同时NK细胞治疗技术同样存在诸多重大挑战，如何进行高纯度的NK激活扩增首当其冲，其次是大规模生物反应器扩增工艺，以及NK的高效冻存技术。
本次重点讨论高纯度的NK激活扩增，根据来源不同NK细胞的样本来源，来源于人体血液的样本有脐带血、外周血全血以及单采PBMC等，按照样本状态可以分为新鲜样本及冻存样本。按照样本所采用抗凝剂又可以分为肝素盐样本、枸橼酸钠样本及EDTA样本。一直以来，NK激活扩增一直备受样本来源困扰，目前的NK纯因子试剂盒产品一般推荐采用肝素盐作为抗凝剂的样本，对于以枸橼酸钠及EDTA的样本效果不佳。
肝素盐作为抗凝剂一般用于小体积血液采集，如8mL真空采血管，无法适应NK大规模扩增生产的血液样品量需要。而大容量采血袋一般都是用枸橼酸钠作为抗凝剂，NK细胞激活及扩增效果不佳。
肝素盐抗凝维持时间相对较短，长期保存易造成凝血导致分离效果不佳。常规肝素盐一般为动物源性，在工艺端引入高风险控制因素。
为针对性建立冻存样本的NK激活扩增工艺， PBMC冻存样本进行NK扩增，NK纯度及扩增效果不佳。
针对NK细胞体外激活扩增所面临的挑战，东富龙生物试剂推出了新一款NK细胞无血清培养试剂盒CulLymNK-KIT03，通过试剂盒配方的升级优化，使其对于不同样品有广泛的普适性，解决不同样本来源的NK激活扩增难点。
产品介绍(与CulLymNK-KIT02的相关性)
CulLymNK-KIT03在CulLymNK-KIT02基础上为NK细胞高效扩增专门研发，该试剂盒化学成分明确，含有临床级人源人血白蛋白成分，培养过程中仅需添加少量自体血清（血浆）。可广泛适用于各种培养工艺(静置培养，生物反应器培养等)下的NK细胞体外高效激活扩增培养。
CulLymNK-KIT03成功解决了传统NK试剂盒对血液样本使用的抗凝剂类型的局限性要求（仅适用于肝素盐抗凝样本）以及冻存PBMC的NK激活扩增效果稳定性问题，同时近一步提高了扩增倍数及速率。
产品优势
采用医药级激活抗体组合，化学成分明确，无动物源的组分，无任何滋养层细胞。
直接以PBMC为样本，无需对样品进行NK分选作业， NK细胞纯度可达80-90%以上。
扩增能力强，支持NK细胞体外高倍快速增殖。
通用性好，可同时适用于肝素盐及枸橼酸钠抗凝样本，可用于冻存PBMC样本。
cGMP标准生产，采用一次性生产技术工艺，产品品质可靠，性能稳定，一致性高。
应用案例与操作过程
样本信息：冻存样本，枸橼酸钠抗凝，D0以2.5E6/mL密度接种，前期激活（D0-7）后扩增（D7-21）。
结果展示
图1-1 细胞生长曲线图：
D14，CulLymNK-KIT03组细胞
总扩增倍数124，对照组为58倍。
D21，CulLymNK-KIT03组细胞
总扩增倍数1029，对照组为387.6倍。
图1-2 NK纯度图：
D14，CulLymNK-KIT03组NK纯度达到65%，
对照组NK纯度达到45.4%。
D21，CulLymNK-KIT03组NK纯度达到83.3%，
对照组NK纯度达到65.7%。
产品订购信息
CulLymNK-KIT03可保证人NK细胞体外激活扩增，培养维持大于21天，整个培养阶段均可维持快速扩增。可适用于肝素盐及枸橼酸钠抗凝的样本，也适用于冻存PBMC样本（配套商业化人AB血清或商业化血清替代物）。
撰稿：颜小芳
审核：郭尚旭
排版：刘雪
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