免疫治疗在抗肿瘤治疗中的作用备受关注，基于免疫治疗的新药开发和标志物探索，成为了当前肿瘤研究的热点，这也对临床前研究中动物模型的建立和使用提出了更高的要求。
由于人与小鼠的物种差异和免疫排斥特性，在野生型小鼠中使用人类生物制剂可能引发抗药物抗体，最终导致该生物制剂快速清除，进而消除药效。为了规避小鼠的抗药物反应，经常创建鼠源药物替代品，但其功能和机制可能与原始人类药物有差异。为了克服这些限制，利用人类肿瘤和免疫系统的人源化小鼠模型已经实现应用。免疫系统人源化小鼠模型允许在小鼠体内利用人类药物调节人类免疫反应来杀灭人源肿瘤，弥补啮齿类动物模型与临床之间的差异[1]。免疫系统人源化小鼠模型建造主要有3种方法，区别在于移植物的不同，包括:相比另外2种方法，PBMC构建法简单、经济、快速，缺点在于接种后容易产生GvHD反应导致小鼠死亡，实验窗口期短。![]()
通过移植PBMC来构建免疫系统人源化小鼠模型方法及数据。Hu-PBMC模型是将人PBMC接种到重度免疫缺陷小鼠体内，一般通过静脉注射，接种量5×106cells/200μL/只。受体动物接种前通常不需要辐照，防止产生过重的GvHD反应。![]()
图2：PBMC接种后小鼠体重、GvHD评分、生存率统计移植不同Donor的PBMC，每周2次小鼠体重测量和GvHD评分，由上图可见，在接种后第3-4周，部分Donor的小鼠开始出现GvHD反应，随着时间推移，GvHD反应愈加严重，最后导致小鼠死亡。同时也有部分Donor的小鼠GvHD反应出现的时间较晚，随着时间推移，GvHD反应有所上升，但总体不是很严重，这部分Donor小鼠给药窗口期长，可作为后续药效实验的候选Donor。![]()
接种PBMC后，在D7、D14、D21、D28、D42、D56采集小鼠抗凝血，流式检测hCD45/hCD3/hCD4/hCD8水平。由上图可知，接种PBMC后1周，能检测到较少的hCD45+cells，2周时，hCD45+cells比例显著上升；hCD3+cells几乎占据hCD45+cells的全部，也就是说PBMC重建的几乎都是T细胞；hCD4+cells随时间推移占比降低，而hCD8+cells占比有所上升。![]()
图4：Anti-PD1在hu-PBMC模型上的药效评价Hu-PBMC小鼠模型皮下接种MDA-MB-231人乳腺癌细胞构建肿瘤异种移植模型，待肿瘤生长至100mm3左右时开始注射PD1抗体，静脉注射，每周2次，共给药6次。由上图可见，PD1抗体可以显著抑制肿瘤生长，并且由于该Donor的GvHD反应不强，小鼠体重并未出现大幅下降。免疫缺陷鼠静脉注射不同Donor的人PBMC，通过GvHD评分可获得GvHD反应不强的候选Donor；同时通过流式检测免疫细胞的增值情况，评估不同Donor的重建水平；最后使用T细胞为靶细胞的anti-PD1为阳性药进行药效评价，结果显示该模型能显著体现出该药物对于异种移植瘤的抗肿瘤效果。益诺思药效学研究平台，已建成丰富的肿瘤皮下移植瘤模型, 原位瘤模型，免疫系统人源化小鼠模型和 PDX 模型，以及自免、炎症、代谢和中枢神经系统等非肿瘤疾病的药效学实验模型和研究方法，从整体、细胞、分子和基因水平开展新药药效学研究评价，为各类新药研发、申报提供可靠的试验依据，实现了覆盖药物PCC-IND-NDA生命周期的一站式技术服务。![]()
[1] Morillon, Y. Maurice, et al. "The Development of Next-generation PBMC Humanized Mice for Preclinical Investigation of Cancer Immunotherapeutic Agents." Anticancer Research 40.10(2020):5329-5341.[2] Rochere P.D.L., Guil-Luna S., Decaudin D., et al. Humanized Mice for the Study of Immuno-Oncology. Trends Immunol. 39(9):748-763 (2018).上海益诺思生物技术股份有限公司成立于2010年，是国药集团下属中国医药工业研究总院有限公司的控股子公司。秉承“科学引领、质量唯先、诚信敬业、合作共赢”的核心价值观，以创新促发展、以质量求生存、以信誉赢客户、以管理创效益，公司先后通过NMPA的GLP认证、美国FDA的GLP检查、OECD成员国匈牙利政府的GLP认证，AAALAC认证及美国病理学会的CAP认证等，是一家专业的提供生物医药非临床研究服务为主的综合研发服务（CRO）企业。业务范围覆盖早期成药性评价、非临床药效学研究、非临床药代动力学研究、非临床安全性评价研究、临床生物样本分析、生物标志物与转化研究等领域。公司于2024年9月3日在上海证券交易所科创板成功上市（股票简称：益诺思，股票代码：688710）。
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