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前言
“醉驾入刑”以来,“喝酒不开车、开车不喝酒”已经家喻户晓、深入人心。公共安全行业标准《生物样品血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇和正丁醇的顶空-气相色谱检验方法》(GA/T 1073-2013)等标准发布实施以来,为机动车驾驶人血液酒精含量检测提供了技术依据。
全国刑事技术标准化技术委员会(SAC/TC179)在进一步丰富优化该项行业标准检测分析方法、细化完善有关技术要求的基础上,组织制定了《血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇和正丁醇检验》(GB/T 42430-2023)国家标准,将进一步支撑法律和强制性国家标准落地实施,为各类鉴定机构开展血液中酒精含量检验技术工作提供标准方法。
同时,该国家标准可适用于五种醇类物质及丙酮的中毒、死亡检验、医疗急救检验、科学研究等其他更为广泛的场景。
实验原理
根据乙醇等6种化合物易挥发的特性,经与平行操作的标准物质比较,采用顶空气相色谱(HS/GC)检测,依据两种不同性质色谱柱的保留时间进行定性,以峰面积为依据,内标法或外标法定量。或采用顶空气相色谱-质谱(HS/GC-MS)检测,依据保留时间、质谱特征碎片离子进行定性
实验配置
试剂
1.水,符合GB/T 6682规定的三级。
2. 标准物质:乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇、叔丁醇,纯度均不小于99.5%。
3.10.0 mg/mL乙醇(甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇)标准物质储备溶液:分别精密称取标准物质乙醇(甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇)适量,用水配制成10.0mg/mL标准物质储备溶液,0℃~4℃保存,有效期6个月。
4. 5.0 mg/mL内标物叔丁醇标准物质储备溶液:精密称取 500.0mg叔丁醇至100mL容量瓶中,用水定容至刻度,0℃~4℃保存,有效期6个月。
5.0.04 mg/mL内标物叔丁醇工作溶液:精密吸取5.0mg/mL内标物叔丁醇标准物质储备溶液0.8 mL至100 mL容量瓶中,用水定容至刻度,0℃~4℃保存,有效期3个月。
实验条件
1. 气相色谱﹣质谱仪条件:
a)色谱柱:聚乙二醇固定相(30m×0.32 mm×0.25μm)色谱柱或等效色谱柱
b) 柱温:42℃保持3 min,以25℃/min升温至120℃保持4 min。
c)载气:氦气
d) 流速:1.25 mL/min
e) 进样量:0.4 mL
f)分流比:10:1
g)进样口温度:160℃
h) El源电压:70 eV
i)溶剂延迟:1.50 min
j) 离子源温度:230℃
k)四极杆温度:150℃
l) 接口温度:180℃
m)采集方式:全扫描(SCAN)
n)乙醇等6种化合物及内标物的保留时间与特征碎片离子见下表。
2. 自动进样器条件
a)孵化温度:65℃;
b)进样针温度:105℃;
c)孵化时间:10.0 min。
3. 进样
取检材样品(水、血液、尿液)100μl及0.04mg/ml内标物叔丁醇工作溶液500μl置于顶空进样瓶中,旋紧盖垫并置于自动进样器上,孵化后取0.4ml上层气体进样。
试剂
1. 线性
配制乙醇(甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇)质量浓度为0.10、0.20、0.50、0.80、1.00、2.00、3.00mg/ml的标准溶液,按上述条件进样测试。以乙醇(甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇)与内标物叔丁醇的峰面积比(Y)为纵坐标,乙醇(甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇)质量浓度(X)为横坐标进行线性回归,测试结果详见下表。
2. 准确度
取质量浓度为0.20、0.80mg/ml乙醇(甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇)的标准溶液100μl及0.04mg/ml内标物叔丁醇工作溶液500μl置于顶空进样瓶中,旋紧盖垫并置于自动进样器上,孵化后取0.4ml上层气体进样,平行测定六次,测试结果详见下表。
3.检出限和定量限
取质量浓度为0.10mg/ml乙醇(甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇)的标准溶液100μl及0.04mg/ml内标物叔丁醇工作溶液500μl置于顶空进样瓶中,旋紧盖垫并置于自动进样器上,孵化后取0.4ml上层气体进样,平行测定三次。以3倍信噪比浓度为检出限,10倍信噪比浓度为定量限,详见下表。
实验结论
使用智达顶空进样对纯水、血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇和正丁醇进行检验,各化合物线性良好,相关系数在0.9973-0.9999之间;各化合物回收率在80-120%之间,且具有良好的重复性(RSD<3%);各化合物的检出限均小于 GB/T 42430-2023中“HS/GC-MS方法检出限均为0.05mg/ml”的要求。
1、可配置一带二方案,一台进样器同时供两台气相进样。
2、可根据用户需求配置样品托盘的数量,实现超高通量顶空自动进样分析。
3、可根据需要选配自动扫码、移取血样、配标、添加内标等全流程自动化处理方案。
附图
下图为含乙醇(甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇)3.00mg/ml的标准溶液色谱图。
END
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